人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1说明书周期的概念:
细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
将培养基置于 37 °C水槽中回温,回温后喷以70 % 酒精并擦拭之, 移入无菌操作台内。取出冷冻管, 立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿, 否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化后, 以70 % ethanol 擦拭冷冻管外部, 移入无菌操作台内。
细胞名称人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1说明书
形态特性成纤维细胞样
生长特性贴壁生长
特征特性取材自引产的15周胚胎组织,中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:
3传代;3~4天1次。
传代情况 P9
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:12;D18S51:13,20;D19S433:14.2,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,20;D3S1358:14,15;D5S818:12,13;D7S820:10;D8S1179:13,14;FGA:21,23;TH01:7,9;TPOX:9,10;vWA:16;
同工酶
染色体 46,XY
使用权限 A类
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1说明书细胞常规说明:
培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1说明书操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1说明书注意事项:
1、实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminarflow)以紫外灯照射30-60分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。
2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置,其它实验用品用完即应移出,以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。
3、小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4、工作人员应注意自身之安全,须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作,并选择适当等级之无菌操作台(至少ClassⅡ)。操作过程中,应避免引起aerosol之产生,小心毒性药品,例如DMSO及TPA等,并避免尖锐针头之伤害等。
5、定期检测下列项目:5.1CO2钢瓶之CO2压力5.2CO2培养箱之CO2浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水,每周更换)。5.3.无菌操作台内之airflow压力,定期更换紫外线灯管及HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。6.水槽可添加消毒剂(Zephrin1:750),定期更换水槽的水
6、粉末培养基配制好后(加了血清),一般在4度尽量不要超过1个月,如在-20度存放时间可长一些,但最好也不要超过3-4个月,可能对于永生化细胞株来说要求不是太高,细胞娇弱,放置时间不宜过长。
7、开紫外线照射台的时候,就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。这样40分钟后,温度也升上来了。有很多人将他放到37度水浴锅里加热。一定要注意水浴锅的卫生,有的常年不清洗,里面很脏,容易在外面瓶身上吸附大量细菌。因此用它的也一定要勤换水。从水浴锅拿出后,最好找个毛巾擦干上面的水。
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1说明书
狗IgG IgG From Dog Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
山羊IgG IgG From Goat Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
豚鼠IgG IgG From Guinea Pig Serum (≥95%, SDS-... 10MG 免疫球蛋白
马IgG IgG From Horse Serum (≥95%, SDS-PAGE) 10MG 免疫球蛋白
CCC-HPF-1
白脂素(Asprosin)ELISA试剂盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒,英文名:TFPI ELISA Kit白脂素(Asprosin)ELISA试剂盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒,英文名:TFPI ELISA KitELISA Kit for Human Axin-2小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)ELISA试剂盒,英文名:AMY2A ELISA Kit人膜联蛋白-A4(Anxa4)ELISA试剂盒人96T0.078-5 ng/mL小鼠维生素B12(VB12)ELISA试剂盒,英文名:VB12 ELISA KitELISA Kit for Human Retinal dehydrogenase 1小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒,英文名:Hsp-40 ELISA Kit人存活素(Surv)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒,英文名:LFA-3/CD58 ELISA KitELISA Kit for Human Beta-casein小鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒,英文名:MMP-9 ELISA Kit
ELISA Kit for Human Axin-2小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)ELISA试剂盒,英文名:AMY2A ELISA Kit人巨噬唾液酸蛋白(Macrosialin)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒,英文名:CR ELISA KitELISA Kit for Human C-type lectin domain family 4 member E小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒,英文名:LIF ELISA Kit人Cathelicidin 抗菌肽(CAMP)ELISA试剂盒人96T125-8000 pg/mL小鼠V-Ha-Ras肉瘤病毒基因同源物(HRAS)ELISA试剂盒,英文名:HRAS ELISA KitELISA Kit for Human Calcitonin小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒,英文名:17-OHCS ELISA Kit人小肌营养蛋白结合蛋白1 (Dysbindin)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒,英文名:CTSK ELISA KitELISA Kit for Human L-dopachrome tautomerase小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)ELISA试剂盒,英文名:IGFBP1 ELISA Kit
Vincristine sulfate 硫酸长春新碱2068-78-220mg
Vincamine 长春胺1617-90-920mg
Veratryl alcohol 藜芦醇3403620mg
Valepotriate 缬草三酯18296-44-120mg
Vitexin-2”-o-rhamnoside 牡荆素鼠李糖苷64820-99-120mg
Salvianolic acid A 丹酚酸A96574-01-520mg
Leonurine hydrochloride 盐酸益母草碱24697-74-320mg
Dihydromyricetin 二氢杨梅素27200-12-020mg
Abrine 相思子碱21339-55-920mg
cis-9-Octadecenoic acid 油酸112-80-10.1ml
Ciprofloxacin 环丙沙星85721-33-1100mg
尼龙筛网(1m×1m)100目包
25cm2正方斜口透气培养瓶20个包
Glimepiride 格列美脲5g瓶
CTAB 溴代十六烷基三甲胺25g瓶
1M Tris-HCl(PH=9.0)100ml瓶
SYBR Green I(10000×)100ul瓶
Kanamycin (100mg/ml)卡那霉素10ml瓶
人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1说明书ZFX 英文名称: 锌指蛋白X染色体蛋白抗体 0.2ml
DUSP1 英文名称: 原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体 0.1ml
活化转录因子4抗体 Anti-ATF4 0.1ml
Anti-CD64/PE 荧光素PE标记免疫球蛋白G Fc段受体IMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷酸化真核启动因子2α抗体 规格 0.1ml
Elastin 弹性蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg