尿嘧啶-DNA糖基化酶

规格：500U
英文名：Uracil DNA Glycosylase(UDG)
产品简介:
E.coli 尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)催化尿嘧啶从含尿嘧啶的 DNA 上释放。
UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。应用:
在 37℃ 条件下,1 单位 UDG 与 0.1μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后,此 DNA 不能再被 DNA聚合酶复制。95℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解,也可以立即用酚/氯*(代"仿")抽提反应产物。
反应条件:
1X UDG 反应缓冲液 [20 mM Tris-HCl,1mM EDTA,1 mM DTT (pH8.0)]。37℃ 温育。
单位定义:
1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃条件下,30 分钟从 50 μl 含 0.2μg DNA (104-105 cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,50 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,0.1 mg/ml BSA,50% Glycerol,pH 7.4 @ 25℃
备注:
UDG 在较广的 pH 范围内均有活性,最适 pH 是 8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度 (>200 mM) 所抑制。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。