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- 武汉博尔夫生物科技有限公司
- 石蜡冰切免疫荧光染色-切片全景扫描
¥45
2021-07-13 02:58
我要认领武汉博尔夫生物科技有限公司
鄢哲雄
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产品属性
产品说明
实验步骤：
- 石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。
- 抗原修复：切片置于盛满EDTA抗原修复缓冲液（PH8.0）的修复盒中于微波炉内进行抗原修复。中火8min停火8min转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。(修复液和修复条件根据组织来确定）
- 画圈自发荧光淬灭：切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈（防止抗体流走），在圈内加入自发荧光淬灭剂5min，流水冲洗10min。
- 血清封闭:在圈内滴加BSA孵育30min。
- 加一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗，切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）
- 加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗覆盖组织，避光室温孵育50min。
- DAPI复染细胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min。
- 封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片，封片后4度避光切片盒保存。
四.石蜡切片免疫荧光结果判读DAPI染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色，阳性表达为相应荧光素标记的红光或者绿光以上实验步骤由武汉博尔夫生物科技有限公司提供，如有需求可以电话联系：15871419002（微信同号）
