4.2.13细胞骨架免疫荧光实验

【生物背景】

细胞接种在盖玻片上，生长24小时后，加入药物。药物作用完后，用预冷的PBS缓冲液（137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na₂HPO₄，1.8 mM KH₂PO₄，pH 7.4）洗2次，每次10分钟。在含4%福尔马林的PBS缓冲液中4℃固定20分钟。PBS洗2次，每次10分钟。在含0.1% Triton X-100的PBS中穿透5分钟。PBS洗2次，每次10分钟。加入含β-微管蛋白一抗（1：200稀释）的2% BSA/PBS，37℃孵育2小时。PBS洗2次，每次10分钟。加入含Alexa Fluor® 488偶联的羊抗鼠IgG二抗（1：200稀释）的2% BSA/PBS，37℃孵育1小时。PBS洗后，加入含0.1 μg/ml DAPI的2% BSA/PBS，37℃孵育30分钟。PBS洗3次，每次10分钟。最后将盖玻片用含50 %甘油的碳酸盐缓冲液 (carbonate buffer, pH 9.0) 封片于载玻片上，用带拍照系统的荧光显微镜观察，拍照。

【筛选项目】

【筛选价格】

周期：4周到5周

送样量2~3mg

每个化合物测试每个细胞株的细胞骨架免疫荧光实验：170元/孔。（起测量至少20个孔）

【结果示例】