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| 数量 | 大量 |
| 英文名 | Cryptosporidium spp. SYBR qPCR Kit |
| 保质期 | 一年 |
| 供应商 | 上海钰博生物科技有限公司 |
| 保存条件 | -20℃保存 |
| 规格 | 50次 |
隐孢子虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒
Cryptosporidium spp. SYBR qPCR Kit
产品及特点
隐孢子虫(Cryptosporidium)为体积微小的球虫类寄生虫，广泛存在多种脊椎动 物体内，寄生于人和大多数哺乳动物的主要为微小隐孢子虫(C. parvum)，引起隐孢子 虫病(cryptosporidiosis)，是一种以腹泻为主要临床表现的人畜共患性原虫病，因此对 隐孢子虫进行快速灵敏的诊断具有重要的意义。本产品就是根据隐孢子虫 rRNA 编码基 因的保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。本试剂盒具有下列特点：
1. 根据隐孢子虫 OWP（oocyst wall protein）编码基因保守序列设计的专一性引物，
与其他肠道疾病病原体（如 B.hominis、E.coli、E.dispar、E.moshkovskii、
V.cholerae 等）无交叉反应。
2. 灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级，可以达到几十拷贝/反应。
3. 即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 100 次 20uL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。 
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qPCR MagicMix | 0.5 mL（装 A 袋） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（装 A 袋） |
| 试剂三 | 隐孢子虫 PCR 引物 F | 0.5 OD（装 B 袋） |
| 试剂四 | 隐孢子虫 PCR 引物 R | 0.5 OD（装 B 袋） |
| 试剂五 | 隐孢子虫基因阳性对照 (1×10E8 copy/μL) | 50 μL（装 C 袋） |
| 使用手册 | 1 份 |
| 成分 | 样品管 N+2 个 | PCR 阴性 对照管 | PCR阳性对照管（2-7 管） |
| 2×qPCR MagicMix | 10μL | 10 μL | 各 10 μL |
| 引物混合物 | 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
| 自备 10×ROX (见注) | 2 μL | 2 μL | 各 2 μL |
| 待测样品 DNA 模板 | 1-5 μL | - | - |
| 阳性对照（2-7 号） | - | - | 各 5μL（2 号样到 2 号管，3 号样到 3 号管…） |
| 补水到 | 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 3 分钟 |
PCR 反应 （45 个循环） | 95℃ | 30 秒 |
| 55℃ | 30 秒 | |
| 72℃ | 30 秒 |
12.数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时，最大吸收光谱在 471 nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm，最大发射光谱在 530 nm。
四、数据处理
13. 以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品 的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值，再推算出其浓度。
