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催产素受体(缩宫素受体)抗体-----抗原修复的几种常用方法:
微波炉加热
在微波炉里加热0.01枸橼酸钠缓冲液(pH6.0)至沸腾后将组织芯片放入,断电,间隔5-10分钟,反复1-2次,根据玻片情况可参考采用微波加热“3-5-3法”3分钟温火沸腾后静止5分钟,再温火沸腾3分钟即可。
适用的抗原:来源于人、大鼠、小鼠的组织标本,来源于其他动物种属的组织标本。
沸热修复
电炉或水浴锅加热0.01M枸橼酸钠缓冲液(pH6.0)至95℃左右,放入组织芯片加热10-15分钟。
高压热修复
在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01m枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0),盖上不锈钢锅盖,但不能锁定,将玻片置于金属染色架上,缓慢加压,使玻片在缓冲液中浸泡五分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起来,10分钟后除去热源,置入凉水中,当小阀门沉下去后打开盖子,此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。
酶消化方法
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液,胰蛋白酶使用前预热37℃,消化时间约为5-30分钟,
适用于被固定遮蔽的抗原,包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等。
催产素受体(缩宫素受体)抗体操作步骤组织固定时间和所需的抗原热修复的关系:
大量的实验表明,固定时间越长的标本,它所形成的桥连就越紧密,抗原就越难以被激活,所需要的修复强度也就越强,随着固定时间的延长,组织中蛋白对温度的耐受也相应增高,这可能就是我们对固定时间长的标本加大修复强度的理论基础。
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Ab-(008)-10931 Mouse Anti-human IgG(3D3)/HRP 辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 ,品牌: 公司提供Santa、Abcam、MBL、CST等抗体品牌 ,规格: 0.1ml
Ab-(008)-10932 Mouse Anti-human IgG(3D3)/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 ,品牌: 公司提供Santa、Abcam、MBL、CST等抗体品牌 ,规格: 0.1ml
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