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WB实验外包

价格：￥1000

品牌：开学季优惠活动：凡在本公司完成western blot试验，样本量达到一定要求，除少数特殊蛋白的抗体外，公司将为客户提供抗体（abcam、CST、Santa Cruz等品牌）免费用于western blot试验，客户不需要额外提供抗体或付费购买。

最新更新日期：2021-07-15 14:50

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南京博恩生物技术有限公司

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公司：南京博恩生物技术有限公司

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产品属性

提供商	南京博恩生物技术有限公司

服务名称	WB实验外包（抗体全免）

产品说明

近年来越来越多的文章科研造假被挖出，甚至涉及到NATURE等期刊，这其中最被诟病的就是western blot实验的造假，大多文章撤稿都和western blot条带造假被发现有关。

因此越来越多的期刊要求作者在投稿时必须上传western blot条带结果未经剪裁的原图，甚至要求这些图片必须要有全长marker标识相应蛋白的分子量。这个是不可逆转的大趋势，逐渐越来越多的期刊会加入到这一标准中来。现在做实验，如果还不用这套标准，未来投稿将寸步难行。

如果您担心自己的科研前途毁于western blot的被造假，那选择博恩生物是最佳选择。博恩生物除了为您提供拟合好的高颜值大图外，还为您献上带有marker分子量的史上最严格的western blot原始图片，就算投nature也会再担心条带造假的问题。全网您只能在博恩生物得到这样的支持。

那究竟什么叫做原图呢？期刊对于原图又有什么要求呢？
我们可以对比一下下图中1、2、3。图一是最普通的条带图，图2虽然是未裁剪的，但是并没有全长的marker标识分子量。而博恩生物提供给客户的结果都是图3这种最高的标准结果图。目前大部分期刊也都是要求的图3这种图。但是这种做法的缺点就是成本高，实验难度大。因此大部分实验室和公司都不会采用这样的方式。

蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot，是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
通过抗原抗体反应对目标蛋白的表达进行半定量检测，还可用于蛋白-蛋白、蛋白-DNA和蛋白-RNA相互作用的后续分析。WB作为一种方便可靠的研究工具，将与质谱和蛋白质芯片等技术一起在蛋白质组时代发挥重要作用。

实验原理：
蛋白免疫印迹杂交（Western Blot WB）是将蛋白样本通过电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜（blot）上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

实验流程：
western blot一般步骤：蛋白质抽提，蛋白质定量，变性不连续凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白质转移，western blot膜的封闭和抗体孵育，western blot结果检测，western blot数据分析。

Western blot、ELISA、免疫荧光、免疫组化的区别：
免疫组化或免疫荧光：检测蛋白表达，为定性实验为主，一般应用于组织居多，细胞应用较少，细胞可以使用免疫荧光实验。主要用于考察蛋白的定位、共定位等情况。
推荐应用：临床组织、动物组织标本的关键性蛋白检测。

western blot：检测蛋白表达或转录后修饰（磷酸化、剪切体、甲基化、苏素化、泛素化、乙酰化、多聚体、降解等），与其他实验技术结合可以达到多种目的。应用最为广泛。细胞和组织都可以应用，也可以通过提取不同亚细胞组成用于检测蛋白的定位情况。为半定量实验。
推荐应用：细胞或组织中通路蛋白、一般蛋白的表达或转录后修饰。

ELISA：为定量实验，主要用于分泌型蛋白的检测居多。也可以用于动物血清、组织、细胞上清的蛋白检测。但是不适用于蛋白转录后修饰的检测，不推荐通路相关蛋白的检测。
推荐应用：细胞上清、组织、动物血清中分泌型蛋白，如细胞因子的检测。

PCR、western blot、ELISA的取舍？

PCR：检测的是mRNA，在一些特定情况下mRNA变化不等同于蛋白变化，如蛋白降解等。此外，某些mRNA是一定可以翻译成蛋白的，如miRNA、lncRNA、circRNA等，这种情况只能选择PCR检测RNA。此外，一些通路蛋白，如p65、β-catenin等，有较多转录后修饰方式，如磷酸化，这种发生于蛋白层面的变化PCR也是无能为力的。
推荐应用：临床组织、动物组织标本的mRNA、lncRNA、circRNA、miRNA检测。

western blot：检测蛋白表达或转录后修饰（磷酸化、剪切体、甲基化、苏素化、泛素化、乙酰化、多聚体、降解等），与其他实验技术结合可以达到多种目的。应用最为广泛。细胞和组织都可以应用，也可以通过提取不同亚细胞组成用于检测蛋白的定位情况。为半定量实验。
推荐应用：细胞或组织中通路蛋白、一般蛋白的表达或转录后修饰。

ELISA：为定量实验，主要用于分泌型蛋白的检测居多。也可以用于动物血清、组织、细胞上清的蛋白检测。但是不适用于蛋白转录后修饰的检测，不推荐通路相关蛋白的检测。
推荐应用：细胞上清、组织、动物血清中分泌型蛋白，如细胞因子的检测。

Western blot内参选择可参照下表：