用途:瞬时和稳定转染。
性能:- 阳离子聚合物、纳米微粒,非脂质体,细胞易吸收。带正电的阳离子纳米聚合物做成纳米颗粒,与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后,通过内吞作用进入细胞。
- 经Ames-test检测,超低毒性,细胞存活率高,转染效率高。
- 通过克服细胞屏障,显著增强基因表达及蛋白表达。
- 适用于多类细胞系:常用类型细胞系、原代细胞及其他难转染的细胞。
- 一管式:操作非常简便,转染后无需更换培养基。
- 兼容血清和含抗生素的培养基。
- 单次实验成本低:转染载体以及转染试剂的使用量都很少,如六孔板只需2µg质粒,与转染试剂的比例范围为1:3-1:6。
简要操作步骤:稀释DNA样本→添加TS3000→转移到细胞中注意:- 配制DNA转染复合物时,需用无血清无抗生素培养基,如Opti-MEM medium等。
- 选择最佳的转染试剂与DNA用量比例。
- 转染后无需更换培养基,但不包括某些对毒性敏感的细胞系。
两种做法比较:一管式:准备DNA转染复合物时,吸取一定量无血清、无抗生素的培养基,加入质粒,然后加入TS3000。
常规法:如Lipo2XXX,需2支离心管,分别稀释质粒和转染试剂,然后把两管溶液合并。Lipo2XXX的6孔板所需质粒为4µg,对应转染试剂的体积多出很多,细胞毒性大,单次成本高。