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无RNase的DNase溶液 ,1U/μL

价格：￥1

品牌：xuanya

产地：中国/美国

最新更新日期：2021-07-15 18:42

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上海烜雅生物科技有限公司

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产品属性

保存条件

常温运输和保存

保质期

两年

英文名	RNase-free DNase

数量

860

供应商	上海烜雅生物科技有限公司

规格

100mL

产品说明

无RNase的DNase溶液 ,1U/μL产品及特点：
本产品是从牛胰DNase中精制的无RNase污染的DNase，专门用于降解RNA样品中的DNA污染，具有下列特点：
1. 高效，能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平。
2. 同时降解单链DNA和双链DNA。
3. 不含RNase，可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
4. 反应条件经过优化，可以用于快速降解硅胶膜上吸附的DNA，也可以用于快速降解液体反应体系中的DNA。
5. 可以用于总RNA提取和体外转录中去除DNA。也可用于切口平移（Nick Translation）和DNase印迹法研究DNA-蛋白质相互作用。

无RNase的DNase溶液 ,1U/μL运输及保存：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂：超纯水。

无RNase的DNase溶液 ,1U/μL使用方法
一、去除RNA样品中污染的基因组DNA（仅供参考，本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂）
1. 在一无RNA酶的离心管中配制10μL的反应液：

2. 混匀，短暂离心，37℃放置 30 分钟；
3. 加入2 uL 50 mM EDTA 溶液，65℃放置15分钟。此步可以灭活DNase。 RNA 在加热时容易水解，也可以使用酚/氯仿抽提去除 DNase，然后再乙醇沉淀 RNA。如果 RNA 在 20ug 以上，也可以使用本公司的 RNAclean 试剂盒进行柱式纯化，回收 RNA。
4. 电泳检测是否去除了基因组 DNA，然后进行后续实验。

无RNase的DNase溶液 ,1U/μL二、除去硅胶膜离心吸附柱上的 DNA（仅供参考，本试剂盒不含 RNase-free DNase 以外的所需试剂）
1. 在柱式法提取过程中，完成洗涤步骤。
2. 配制 50 uL DNase 工作液。

3. 加在离心吸附柱中间，室温放置 5-30 分钟。
4. 加入 0.5 mL 自备洗柱液洗涤两次。
5. 用 RNA 洗脱液洗脱即得无 DNA 的 RNA 样品。

无RNase的DNase溶液 ,1U/μL三、除去 RNA 体外转录反应中的 DNA 模板（仅供参考，本试剂盒不含 RNase-free DNase 以外的所需试剂）
1. 按 2 U RNase-free DNase/ug DNA 模板的比例在 RNA 体外转录反应中加入 RNase-free DNase。
注意：
酶的最佳用量也许需要优化。
2. 37℃放置 15 分钟。
3. 加入2 uL 50 mM EDTA 溶液，65℃放置15分钟；此步可以灭活DNase。 RNA 在加热时容易水解，也可以使用酚/氯仿抽提去除 DNase，然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA 在20 ug以上，也可以使用本公司的RNAclean 试剂盒（需另购）进行柱式纯化，回收 RNA。

无RNase的DNase溶液 ,1U/μL四、用于切口平移法（Nick Translation）DNA 探针标记（仅供参考，本试剂盒不含 RNase-free DNase 以外的所需试剂）
1. 按下表设置切口平移标记反应：

无RNase的DNase溶液 ,1U/μL注：稀释 RNase-free DNase 的缓冲液为 1×DNA 聚合酶 I 缓冲液：50 mM
2. 15℃放置 15-60 分钟。
3. 加入 10 uL 50 mM EDTA 溶液。
4. 65℃放置 15 分钟灭活酶。
5. 所得探针可以纯化后使用，也可以直接使用。

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