| 保质期 | 1 |
| 数量 | 900000 |
| 保存条件 | 常温 |
| 规格 | 20T |
| 产品及特点 | 基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,天泽基因在植物DNAOUT产品基础上开发了本产品。其特点如下: 1. 适合于大多数药材。 2. 得到的DNA纯净,OD260/280一般都在1.6以上,原液或100倍之内的稀释液一般都能直接作为PCR模板。 3. 操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。 4. 试剂无毒无害,环保卫生。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 规格及成分 |
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| 运输及保存 | 常温运输及保存,有效期一年。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 自备试剂 | 氯仿、异丙醇、75%乙醇 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 使用方法 | 1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取0.75 mL加入到10-15mL的塑料离心管中并放置于65℃待用。 2. 称取20 mg左右的中草药,先剪成或研磨成微小的碎片,然后转移到预热的溶液A中匀浆,匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。也可以液氮研磨后将中草药粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中研磨,因为其主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA,降低DNA回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。 3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后全部转移到新的1.5mL塑料离心管中(此时匀浆液较为粘稠,可将枪头剪去一截后转移上清,植物碎片可倒入)。 4. 12000-15000 g室温离心3分钟,将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中(上清液的体积一般为200-700 µL,如果体积超过700 µL,多余部分可以不要)。有的上清液中会有少量细小块状物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。 5. 在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀(溶液将呈白色混浊状),然后置冰浴中5分钟。 6. 12000-15000 g室温离心3分钟,转移上清到新离心管中。 7. 加入0.2 mL的氯仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。 8. 12000-15000 g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。小心转移上清到新离心管中。 9. 重复氯仿抽提步骤一次,此步可以有效去除含色素物质。 10. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备),上下颠倒30秒混匀。 11. 12000-15000 g离心5分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。 12. 沉淀用75%乙醇清洗2次后,室温晾干。 13. 加入50-100 µL自备缓冲液(如TE)溶解沉淀。DNA即可用于电泳,酶切和PCR等反应。如果需要测OD,则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。注意:用本产品提供的RNase处理DNA样品时,做好按《分子克隆手册》等参考书上的方法彻底去除其中的DNase。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 使用效果 | 用本产品成功提取到可以扩增的DNA的中药材部分列表(OD为三次实验平均值)
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| 关联产品 | PCR Inhibitor Erasol (CAT#:60804) |