WHO推荐的精子形态的评估方法有巴氏染色法、Shorr染色法和Diff-Quik染色法。 精子形态学染色液(shorr法)染色原理与巴氏染色法相似,因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷,能选择性地结合相应的染料而着色。胞核由酸性物质组成,它与碱性染料的亲和力较强;而胞浆则相反,它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。特别适用于精子的染色,亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。
操作步骤
1. 细胞涂片用95%乙醇-冰乙酸(3:1)固定液固定10-15min。
2. 80%、70%、50%的乙醇分别浸泡1min。
3. 蒸馏水或自来水浸泡或冲洗1min。
4. 苏木素染色液染色3-5min。自来水冲洗2min。
5. 5、(可选)0.5%的盐酸乙醇分化液分化4-5s。自来水冲洗2min。
6. 蓝化液中蓝化4min。
7. 自来水冲洗2min。
8. 用猩红橙黄染色液染色1-2min。
9. 蒸馏水速洗,然后入媒染液处理1-2min。
10. 入固绿染色液染色4min。
11. 直接用1%冰cu酸分化30s。
12. 水洗,然后经50%、70%、80%、95%、无水乙醇脱水。
13. 二甲苯透明,中性树胶封片。
