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南京云桥生物科技有限公司
细胞粘附实验
细胞粘附实验
价 格:
¥1 - 1999
最新更新日期:
2021-07-15 19:43
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南京云桥生物科技有限公司
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公司:
南京云桥生物科技有限公司
联系人:
闻静
联系电话:
13851661351
025-58805716
联系邮箱:
originnanjing@163.com
QQ:
506890511
产品说明
细胞粘附实验
实验原理
细胞粘附实验
通常分为两类,即细胞与细胞粘附和细胞与基质粘附。机体内许多细胞,如上皮细胞固定在某处发挥功能;另一些细胞,如白细胞,活跃运动,就需要不断调节细胞粘附。细胞粘附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞相互识别及粘附机制发生了改变。用到测定细胞粘附性的实验有:机械法测定细胞粘附性,发射性核素法测定细胞粘附性,细胞分离实验和肿瘤细胞聚集体形成实验。
细胞粘附实验
实验步骤
试剂:
FN
纤连蛋白,
BSA
试剂,
96
孔板,
MTT
或
CCK-8
试剂
1.
用
10 µg/ml
的
FN
预铺
96
孔板,
70 µL/
孔,
4
℃后,
PBS
洗
3
遍,再用
1% BSA
于
37
℃封闭
1 h
,
PBS
洗
3
遍
2.
待测细胞培养至对数生长期,消化细胞,用无血清培养基悬浮细胞,用血球计数板计数,调整浓度为
5*105/mL
分别接种于预铺
FN
的
96
孔板中,每孔
5000
个细胞,每组设
3
个复孔。
37
℃孵育
1 h
后,
PBS
洗去未黏附的细胞。
细胞粘附实验
检测方法
方法
1
:
3.5%
glutaraldehyde
于
4
℃固定
0.5 h
,
PBS
洗
3
遍;
0.1%
的结晶紫染色,室温静止
0.5 h
,
PBS
洗
3
遍,每孔加入
100
μ
L 10%
的乙酸,
5~10 min
后用酶标仪检测
595 nm
的吸光度值,用以表示黏附细胞的多少。
方法
2
:按照每孔加入
100 µL
甲醇,固定
15 min
每孔加入
100 µL
吉姆萨染液,染色
15 min
,
PBS
洗去染液倒置显微镜下随机取
5
个随机视野计数粘附细胞数量病拍照,统计结果。
方法
3
:
MTT
法或
CCK-8
检测细胞量。
细胞粘附实验
客户需要提供
1
客户提供实验分组情况及实验背景资料,有具体要求请事先说明;
2
细胞株(也可以由我们提供)、干预因素原料;
3
干预药物及浓度。
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