液质联用技术(HPLC-MS)即是将液相色谱与质谱联接起来使用，在通过HPLC有效的分离混合物的同时又可通过质谱检测物质的结构信息，此技术将汇聚了液相色谱对复杂样品的高分离能力及质谱的高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的能力，在蛋白质组学等领域得到了广泛的应用。

液质联用程序图

本公司主要通过液质联用仪并采用iTRAQ技术对蛋白质进行研究。
由美国应用生物系统公司(Applied Biosystems Incorporation，ABI)2004年开发的同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ)技术，是一种新的、功能强大的可同时对四种样品进行绝对和相对定量研究的方法，这种方法是建立在iTRAQ试剂的基础上。
iTRAQ试剂结构：
reporter group：质量为114Da、115 Da、116 Da、117 Da，因此iTRAQ试剂共四种；
peptide reactive group：将reporter group与肽N端及赖氨酸侧链连接，几乎可以标记样本中所有蛋白质；
balance group：质量为31 Da、30 Da、29 Da、28 Da，使得四种iTRAQ试剂分子量均为145 Da，保证iTRAQ标记的同一肽段m/z相同；

iTRAQ 试剂标记原理
综上：
4个来源不同的相同蛋白样品在一级质谱上表现相同
Balance group在二级质谱发生中性丢失
Reporter group 在二级质谱产生４个报告离子，分别是114、115、116和117
通过分析报告离子的峰强度比值就可以分析同一个蛋白在不同样品间的表达量比值；

操作流程：

主要特点：
1.分离能力强、分析范围广
2.定性分析结果可靠，可以同时给出每一个组分的分子量和丰富的结构信息
3.MS具备高灵敏度、检测限低
4.分析时间快，分离效果好
5.自动化程度高
应用：
1.可在分子水平上进行蛋白质、多肽、核酸的分子量确认，氨基酸和碱基对的序列测定及翻译后的修饰工作。
2.目前己在生化分析、天然产物分析、药物和保健食品分析以及环境污染物分析等领域得到了广泛的应用。
3.iTRAQ技术不仅可发现胞浆蛋白，还有膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白。
4.iTRAQ技术可检测出低丰度蛋白、强碱性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白发现蛋白数量多，但iTRAQ技检测的蛋白量的变化是二级串联质谱中指示基团离子峰的面积比而不是一级质谱中肽段之间的比值，是间接反映蛋白量的变化，因此在蛋白量变化的计算上不是十分理想。

我公司itraq技术平台优势：
1. 寻找差异表达蛋白，并分析蛋白功能。
2. 定性与定量分析蛋白：分析结果可得出各样品中蛋白名称及蛋白量的比值