货号 PH0122

名称 PCR Reaction Kit (2000bp) | PCR反应试剂盒(2000bp)

存储 -20℃，有效期一年。

本试剂盒包含完成PCR反应所需全部试剂，可进行PCR实验的教学和科研。其中模板为质粒DNA；引物为根据质粒DNA序列设计的上、下游引物；2×Taq PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。

使用本试剂盒进行PCR反应后，PCR产物大小应为2000bp。

组成 浓度 体积

模板 10 ng/μl 30 μl

上游引物（2000 FW） 10 μM 30 μl

下游引物（2000 RV） 10 μM 30 μl

2×Taq PCR MasterMix(含染料) - 2×500 μl

去离子水 - 1 ml

1. 冰浴中彻底融化模板，引物和2×Taq PCR MasterMix，混匀后快甩离心将溶液收集到管底。

2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

/ 50μl反应体系

上游引物（2000FW） 10μM 1 μl

下游引物（2000RV） 10μM 1 μl

模板 1 μl

2×Taq PCR MasterMix 25 μl

水 22 μl

3. 快甩离心将反应液收集到管底。

4. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。

5. PCR仪上执行以下程序：

步骤 温度 时间 循环数

初始变性 94℃ 5 min 1

变性 94℃ 30 sec 30

退火 54℃ 30 sec

延伸 72℃ 2 min

最后延伸 72℃ 5 min 1

6. 反应完成后，取5ul反应液，1％琼脂糖凝胶电泳，观察条带情况。

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