乳酸杆菌属通用PCR试剂盒

¥2490
康朗生物
中国/上海
2021-07-17 05:26

上海康朗生物科技有限公司

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上海康朗生物科技有限公司
蔡盼
18217752821 021-61998208
shklbio@163.com
产品属性
数量大量
英文名Lactococcus spp.
保质期一年
供应商上海康朗生物科技有限公司
保存条件负20度
规格50次
产品说明

乳酸杆菌属通用PCR试剂盒

Lactococcus spp. 

产品及特点

乳酸杆菌属(Lactococcus spp.)是指能使糖类发酵产生乳酸的细菌,酸牛奶中有此菌。是一群生活在机体内益于宿主健康的微生物,它维护人体健康和调节免疫功能的作用已被广泛认可,它不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料(在理论上具有重要的学术价值),而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域具有极高的应用价值,因此乳酸杆菌属检测具有重要的意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发,它具有下列特点:: 

1.即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增乳酸杆菌属。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。

乳酸杆菌属通用PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(亮黄盖)

试剂二

超纯水

1 mL(蓝色))

试剂三

乳酸杆菌属PCR引物混合液

100 μL(白盖)

试剂四

乳酸杆菌属PCR阳性对照

50 μL(黄盖))

试剂五

天净沙DNA释放剂试用装

50次(试用装)

试剂六

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。

自备试剂 样品 DNA。




使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

乳酸杆菌属 PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

N+2个样品DNA模板

各18 μL

-

-

样品制备阴性对照

-

18 μL

-

样品制备阳性对照

-

-

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

94℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

94℃

20 sec

58℃

20 sec

72℃

30 sec

最后延伸

72℃

10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!