DiR细胞膜近红外荧光染料

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2021-07-20 19:33

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产品属性
数量大量
保质期-20℃ 避光保存,有效期一年
供应商西安中团生物科技有限公司
保存条件-20℃ 避光保存,有效期一年
产品说明

DiR细胞膜近红外荧光染料

产品编号:DR-05、 DR-10

规格: 5mg、10mg

储存条件: -20℃ 避光保存,有效期一年。。

λEx/λ Em(MeOH) = 748/780 nm

分子式:C63H101IN2

分子量:1013.4

产品介绍

DiR 是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料 常用于标记细胞质膜。DiR 的两个 18-碳链插入到细胞膜, 从而进行特定的、稳定的细胞染色,几乎不会发生细胞间的 染料转移。

DiR(近红外荧光)和其他细胞膜荧光染料如 DiI(橙 色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)配合使用, 为多色成像和流式细胞分析提供了有效的工具。

DiR 染色后可进行Paraformaldehyde(不可使用甲醇等其他试 剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在 固定透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很 好地进行质膜染色。

使用方法

1. DiR细胞膜染色液制备

(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。

注意:未使用的储存液保存在-20 oC,避免反复冻融。

(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~

5 µM的工作液。

注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。

2. 悬浮细胞染色

(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。

(2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。

(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。

(5)重复(3),(4)步骤两次以上。

3. 粘壁细胞的染色

(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

(4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。

4. 流式细胞仪的检测

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。

仅供科学研究使用,禁止用于它用。