| 服务名称 | 生化代谢检测 |
| 提供商 | 长沙南科生物技术有限公司 |
| 规格 | 50元/样品,起价1000元每次检测 |
生化代谢检测:本检测指标包括一氧化氮NO、ADP定量检测、ATP定量检测、ADP+ATP比率分析、DNA损伤定量分析、NAD+NADH定量、NADP+NADPH定量、钙离子(Ca)含量、铁离子含量、镁离子含量等检测。
ADP是ATP脱磷酸后的产物,增加一个磷酸基团即转变成ATP。在ATP与ADP之间的转化过程中,多种磷酸(酯)酶、磷酸化酶以及激酶均参与其中。ADP在体内通常储存于血小板中,在释放后可以与各种嘌呤能受体发生作用。ADP的水平调控着多种参与中间代谢的酶分子。ADP转换成ATP通常发生在线粒体/叶绿体,当然胞浆中也经常发生类似的转换。传统的方法是,使用荧光素酶/荧光素介导的方案来检测ADP的水平。然而,荧光素酶系统不是很稳定,并且其检测设备也不是很普遍,这在一定程度上限制了实验室里ADP的检测。
本检测基于ADP比色法检测ADP,将样本内的ADP转化成ATP和丙酮酸,丙酮酸可以用比色法(λmax = 570 nm)定量。该方法简捷、敏感、稳定,并适用于高通量分析,其在生物样本内的检测灵敏度可以达到1μM ADP。
ATP是生物代谢系统的能量货币。几乎所有的能量依赖性生化反应都要利用储存在ATP高能磷酸键里面的化学能。ATP只在线粒体中合成,许多遗传疾病都会影响线粒体中ATP的合成反应。本检测基于ATP比色法检测ATP,操作简易方便。将甘油磷酸化后会生成一种产物,该生成物能通过测定比色法(λmax=570 nm)定量。其检测技术的灵敏度可以达到50 picomol(1μM)。
NADH,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,,还原型辅酶Ⅰ。N指烟酰胺,A指腺嘌呤,D是二核苷酸。葡萄糖代谢时直接经代谢所产生的ATP是十分的少的,而代谢产生的NADH或FADH2经由一个电子传递与氧化磷酸反应可产生大量的ATP。NADH分子是线粒体中能量产生链中的控制标志物。NADH水平的上升指示代谢失衡的出现。监视NAD/NADH的氧化还原状态是表征活体内线粒体功能的最佳参数。涉及到氧化还原的反应都与之有关,比如呼吸作用,光合作用,尤其是NADH。因此NAD/NADH水平的监控是能量传递、细胞核组织氧化还原态等研究的主要兴趣点。
本实验可以检测哺乳动物样本细胞内NADH、NAD的水平以及相互的比率。该NADH/NAD定量试剂盒内的NAD循环酶混合物特异性的识别酶循环反应中NADH/NAD,因此无需在分析前从样本内纯化NADH/NAD。并且NADH/NAD定量分析试剂盒只特异性的检测NADH/NAD,不会与NADP和NADPH有反应。通过提供的NAD循环酶混合反应体系可以大大提高检测的灵敏度和特异性。最终样本内NADH/NAD的含量可以通过与标准样相比而获得。
NADPH是一种辅酶,还原型辅酶Ⅱ(NADPH),学名烟酰胺腺嘌呤二核苷酸,在很多生物体内的化学反应中起递氢体的作用,具有重要的意义。还有NADP,是其氧化形式。常常存在于糖类代谢过程中。来自于维生素PP。NADPH通常作为生物合成的还原剂,并不能直接进入呼吸链接受氧化。只是在特殊的酶的作用下,NADPH上的H被转移到NAD+上,然后由NADH进人呼吸链。 NADPH是在光合作用光反应阶段形成的,与ATP一起进入暗反应,参与CO2的固定。NADPH的形成是在叶绿体基质中完成的。
本实验可以灵敏检测哺乳动物样本细胞内NADPH、NADP的水平以及相互的比率。组分中德酶体系可特异性的识别酶循环反应中NADPH/NADP,因此无需在分析前从样本内纯化NADPH/NADP。并且NADPH/NADP定量分析试剂盒只特异性的检测NADPH/ NADP,不会与NAD和NADH有反应。通过提供的循环酶反应可以大大提高检测的灵敏度和特异性。最终样本内NADPH/NADP的含量可以在酶标仪或读板仪OD450nm处读取获得。
实验周期:15个工作日内完成,重复检测优惠。
客户注意事项
1、抗体:事先咨询长沙南科生物,明确抗体种属以及是否有该抗体可使用,如有一抗使用费300元每指标,如无可由双方协商而定,客户自己购买提供或我公司代购;
2、标本收集与保存:
组织样品 新鲜组织放入液氮或-70度保存,组织不少于100mg(约绿豆大小);
培养细胞 通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保存于冰箱(-70℃,避免反复冻融);
血液细胞标本 以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,保存(-70℃可长期保存,避免反复冻融)
血清或细胞培养液标本 离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可长期保存,避免反复冻融)
3、样本运输:可选以下任何的一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输;
细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶(密封保证不污染,培养液不漏出,细胞不要长得太满,50%左右,灌满培养液);
血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保证液体不漏出,视路途远近2-3天可到达)。
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