产品描述

Exonuclease III (E.coli) (Exo III) 能降解dsDNA的平末端、5'-突出末端或切口，从dsDNA链的3'-OH末端逐步释放5'-单磷酸核苷酸，产生ssDNA片段。每次Exo III酶结合到dsDNA上时，都有单个核苷酸被移除，从而导致DNA分子群体中不同程度的末端渐进缺失。 
尽管Exo III可以将dsDNA上的Nicks外切成Gaps，但Exo III最佳的底物是平末端dsDNA或3'-末端凹陷dsDNA。 3'-突出末端的dsDNA能阻止Exo III降解，其抵制程度取决3'-突出末端的突出长度，突出4个或更长的碱基能完全阻止Exo III的酶切。同时，该酶对单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。 
Exo III的酶活性部分依赖于DNA的螺旋结构，并表现出序列依赖性(C>A=T>G)。温度、盐浓度和酶/DNA比值对酶活性有很大影响，所以对不同的应用使用不同的反应条件。
Exo III还具有以下三种酶活性，如下：
3'-磷酸酶活性：切除3'-末端的磷酸基团，产生3'-OH基团。
RNase H活性：外切核酸酶活性，降解RNA-DNA杂合体中的RNA链。
AP-内切核酸酶活性：切割脱嘌呤或脱嘧啶位点(AP位点)的磷酸二酯键，产生5'-端无碱基的脱氧核糖5'-磷酸残基。

产品组分

Exonuclease III (E. coli) (100,000 U/ml)	RM20521
10X ABuffer A	RM20125

产品信息

产品来源	来自 E.coli 的Exo III基因在大肠杆菌中表达和分离纯化得到。
应用	DNA聚合酶的应用
活性定义	1活性单位(U)是指在50 μL反应体系中，37°C 30 min催化0.15 mM [3H]-dsDNA释放1 nmol酸不溶性物质所需的酶量。
保存条件	5 mM KPO4, 200 mM KCl, 5 mM β-ME, 0.05 mM EDTA, 200 μg/ml BSA, 50% Glycerol, pH 6.5 @ 25°C
保存温度	-20°C
反应条件	1X ABuffer A, 37°C孵育
反应缓冲液或预混液	1X ABuffer A: 10 mM Bis-Tris-Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, pH 7 @ 25°C
热失活	70°C 加热 20 min