Protein A/G MagBeads (IP Grade) 蛋白A/G免疫磁珠价格,详情介绍-960化工网

Protein A/G MagBeads (IP Grade) 蛋白A/G免疫磁珠

价格：￥787

品牌：Yeasen

产地：上海翊圣

最新更新日期：2021-07-21 18:05

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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品属性

英文名	Protein A/G MagBeads (IP Grade)

供应商	上海翊圣生物科技有限公司

规格

1ml

产品说明

产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存	价格（元）
rProtein A/G MagBeads (IP Grade)蛋白A/G免疫磁珠	36417ES03	1mL	4°C	787.00
rProtein A/G MagBeads (IP Grade)蛋白A/G免疫磁珠	36417ES08	5mL	4°C	2937.00

产品描述
rProtein A/G免疫沉淀磁珠使用“纳米表面生物技术”(S-TEC)，将Protein A/G高密度定向包被到超顺磁性聚合物微球表面，具有更高的抗体结合能力和极低的蛋白非特异性吸附率，一步纯化即可从血清样品中分离出纯度>90%的抗体，使用简便有效。天然蛋白A（Protein A）是一种发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面蛋白，天然蛋白G（Protein G）是一种分离自G型或C型链球菌属的细胞表面蛋白，二者功能相似，主要通过与免疫球蛋白（Ig）的Fc区相互作用，可结合大多数哺乳动物的IgG，但在两者结合特异性上有所不同（详见附录）。Protein A/G免疫磁珠同时共价偶联了蛋白A和蛋白G，比单独的蛋白A或者蛋白G都有更广的结合范围，实用性更高。同时，本品使用的是基因改造后的蛋白A和蛋白G，不仅维持其本身的Ig亲和特性，同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合。本品适用的范围广泛，可应用于细胞裂解液、细胞分泌液上清、血清、动物腹水以及其它的免疫抗原等样本。

产品性质

基质（Matrix spherical）	聚合物磁性微球
配体（Ligand）	重组Protein A/G
结合能力（Binding Capacity）	＞50µghIgG /mg
粒径（Particle size）	1μm
磁珠浓度（Concentration）	10mg/mL
储存缓冲液（Storage Buffer）	PBS，0.01% Tween-20, 0.02% NaN3e
应用（Application）	rProtein Purification, Immunoprecipitation

运输和保存方法
低温运输。4℃长期储存，有效期2年。

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
工作液浓度应根据具体实验确定，建议进行预实验摸索最佳实验浓度。
1. 缓冲液配制

结合/ 洗杂液:	0.15M NaCl, 20 mM Na2HPO4, pH 7.0
交联液：	0.2 M 三乙-醇胺, pH 8.2
中和缓冲液：	1M Tris-HCl，pH8.5
洗脱缓冲液：终止液：	0.1M 甘氨酸，pH 3.0 50 mM Tris, pH 7.5

2. 抗原样品制备
本操作说明书提供以下四种样品处理方法，建议您根据不同来源的抗原样品选择适当的方式进行预处理，使待检测抗原释放至样品溶液中。
血清样品处理：若目标蛋白丰度较高，建议用结合缓冲液稀释血清样品至目标蛋白终浓度为10-100µg/mL，置于冰上备用(或置于-20℃长期保存)。
悬浮细胞样品处理：离心收集细胞（4℃, 500g, 10min），弃上清后称重，按每毫克细胞50µL的比例用1×PBS洗涤2次；按每毫克细胞5-10µL的比例加入结合缓冲液，同时加入蛋白酶抑制剂，混匀后置于冰上处理10min；离心收集上清液（4℃, 14000g, 10min），置于冰上备用（或置于-20℃长期保存）。
贴壁细胞样品处理：移去培养基，按每 1.0×10⁵个细胞150µL的比例用1×PBS洗涤两次；用细胞刮棒刮脱细胞，收集至1.5mL EP管内，按每 1.0×10⁵个细胞20-30µL的比例加入结合缓冲液，同时加入蛋白酶抑制剂，混匀后置于冰上处理10min；离心收集上清液（4℃, 14000g, 10min），置于冰上备用（或置于-20℃长期保存）。
大肠杆菌样品处理：离心收集大肠杆菌（4℃, 12000g, 2min），弃上清后称重，按每克（湿重）菌体10mL的比例用1×PBS洗涤2次；按每克（湿重）菌体5-10mL的比例加入结合缓冲液，同时加入蛋白酶抑制剂，重悬菌体，超声裂解细胞，离心收集上清（4℃, 17000g, 10min）。
3. 磁珠预处理：将磁珠漩涡振荡1min，使其充分混悬；取25-50µL（相当于50-100µg）磁珠悬液置于1.5mL EP管中。加入200µL结合缓冲液洗涤，进行磁性分离，吸弃上清，重复1次。加入200 µL结合缓冲液重悬磁珠备用。
4. 抗体吸附
1) 加入 100 μl平衡液将磁珠悬浮，加入目标抗体溶液，充分混匀。
2) 室温孵育 10min，可以振荡或漩涡混合均匀。
3) 将EP 管置于磁分离器上，待磁珠全部吸附后，吸弃上清液。如需要可留做进一步检测。
4) 加入500μl 洗杂液混合均匀，置于磁分离器上，待磁珠全部吸附后，吸弃上清液。重复洗杂至少 3次。
5. 抗体交联 (备选)
1）如果需要将抗体和目标抗原复合物共同洗脱，请忽略本步骤，直接进行操作 2.5。 50ul-1ml 磁珠量均可以按照以下步骤操作，无需额外增加交联液体积。
2）加入 1ml 交联液，振荡悬浮，置于磁分离器上，大约1min，待溶液变澄清后，吸弃上清液。该操作重复两次。
3）再加入1ml 含有20 mM DMP（dimetylpimelimidate dihydrochloride）的交联液，此试剂需要现用现配。振荡悬浮，在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，促使溶液和磁珠充分接触，约30min后，置于磁分离器上，大约 1min，待溶液变澄清后，吸弃上清液。
4）使用 1ml终止液悬浮磁珠，终止交联反应，在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，促使溶液和磁珠充分接触，约15min后，置于磁分离器上，大约 1min，待溶液变澄清后，吸弃上清液。
5）加入 1ml平衡液，颠倒混匀，置于磁分离器上，大约 1min，待溶液变澄清后，吸弃上清液。再重复两次。
6. 抗原结合反应
1) 加入含有抗原的样品（通常100-1000μL)，用移液器轻轻吹打使抗原与磁珠-抗体复合物均匀分散。
2) 在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管 10min，使抗原与抗体充分结合，如结合力较弱则可在室温下反应1h或者在4℃下反应过夜。
3) 上述完成抗原吸附的磁珠-抗体-抗原复合物进行磁性分离，收集上清液，以备后续检测。
4) 向离心管中加入1ml 洗杂液，用移液器轻轻吹打使磁珠-抗体-抗原复合物均匀分散，然后进行磁性分离，弃上清液；从磁分离器上取下离心管，再重复洗涤两次。
7．抗原洗脱
A. 变性洗脱 此方法洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测。
1) 从磁分离器上取下离心管，向其中加入25μl 1×SDS-PAGE Loading Buffer 混合均匀， 95℃加热 5min。
2) 置于磁性分离器上，进行磁性分离，收集上清液进行SDS-PAGE检测。
B. 非变性洗脱
1) 向磁珠-抗体-抗原复合物中加入50 μl 洗脱液，混合均匀，室温孵育5min。
2) 置于磁性分离器上，进行磁性分离，收集洗脱液至新的 EP 管中。
3) 重复步骤 1）和2），收集洗脱液，与2）中洗脱液混合，加入中和液中和至 pH7.0-8.0。

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