Bradford蛋白定量试剂盒

¥400 - 880
SAB
2021-07-22 00:53

南京莱富赛生物科技有限公司

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产品属性
保质期一年
保存条件染色液2-8℃保存。蛋白标准-20℃保存。
规格250T/100T
产品说明
产品简介:
Bradford法(考马斯亮蓝法),是目前灵敏度最高的蛋白质测定法之一。当Bradford 染色液(考马斯亮蓝G250)和蛋白在酸性条件下结合时,溶液颜色由棕黑色转为蓝色,最大吸光值波长由456nm 转至595nm,吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系,通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值,推算出蛋白浓度,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。

Bradford 染色液为2 倍浓缩母液,便于储存。

使用方法:
A96 孔酶标板测定:
1. 蛋白标准工作液配制:根据样品数量配制相应体积的蛋白标准工作液。将蛋白标准储存液用双蒸水5 倍稀释,配成1mg/ml 的工作液。
2. 标准曲线绘制。取一块酶标板,按以下表格数据加入试剂:
孔号0123456
蛋白标准(ul)01246810
去离子水(ul)100999896949290
Bradford 2x 染色液(ul)100100100100100100100
对应的蛋白含量(ug)01246810

3. 振荡混匀后,室温放置5-10 分钟。
4. 用酶标仪测定A595,以不含BSA 的光吸收值为空白对照。
5. 以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
6. 样品测定:将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度,取10μl 样品,加入100μl 2x Bradford 染色液
90μl 的去离子水,混匀后放置5-10 分钟,然后以0 号孔为对照,测定样品吸收值A595
7. 根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
8. 计算蛋白浓度:以查得的蛋白含量除以样品体积10μl,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。

B.比色皿测定
按照比色皿规格,与以上方法相同,适当按比例增加各溶液体积即可。