Transwell是一种应用Transwell 小室来探究细胞共培养 、细胞趋化 、细胞迁移 、细胞侵袭等的问题的实验技术。
将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。
1. 细胞共培养:两种细胞联合培养,研究其中一种细胞分泌的因子对另一细胞性能的影响,此时选择小于3.0um孔径,细胞不会迁移通过,将细胞A种于上室,细胞B种于下室,可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。可通过流式细胞仪检测表面分子、细胞凋亡等。
2. 趋化实验:两种细胞联合培养,研究其中一种细胞分泌的因子对另一细胞迁移能力的影响,研究某一因子或蛋白对细胞迁移的影响;可用5.0-12.0μm膜,上室细胞可穿过聚碳酸酯膜进入下室,计数进入下室的细胞量可反映下室细胞分泌的因子对上室细胞的趋化作用;或者将细胞种于上室,下室加入某种趋化因子,也可研究该趋化因子对细胞的趋化作用。
3. 细胞迁移实验:研究肿瘤细胞的迁移能力或特定情况下肿瘤细胞的迁移能力。常用8.0、12.0μm膜,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或实验设定的药物或者影响因子,肿瘤细胞可能穿过隔膜到达下室,计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。
4. 细胞侵袭实验:研究肿瘤细胞的侵袭能力或特定情况下肿瘤细胞的侵袭能力。在聚碳酸酯膜上涂上一层基质胶,模仿细胞外基质,上室种肿瘤细胞,下室加入FBS或实验设定的药物或者影响因子,肿瘤细胞在侵袭能力较强的情况下,会分泌相关酶类消化基质胶,从而从上室迁移到下室,通过计数进入下室的细胞量测定细胞的侵袭能力。