细胞转染试剂

¥600
2020-03-24 21:39

广州国奥生物技术有限公司

我要认领
广州国奥生物技术有限公司
广州国奥生物技术有限公司
13535057481 020-29123550
guoaobio@163.com
411193485
产品说明
以下以直径60mm培皿培养的细胞转染
1.在染前一天把2.5×105胞传代到直径60mm的培皿,待第二天达到2.5×105细胞(70-80%)时转染。
2.上下倒置数次或vortex混匀试剂,取60微升加到1毫升无血清的DMEM培养液中后,再加5微克的DNA,轻轻混合后在室温中放置15-30分钟。
3.移去胞培皿中的含10%血清的DMEM培养液,加入1毫升不含血清的DMEM培养液和步骤3准备的1毫升DNA和脂质混合物,在37oC胞培箱内放置4小时后,再加入2毫升含有10%血清的DMEM培养液,5-6小后,吸除含有LipoFu2008-DNA的培液,加入适量的新鲜细胞培继续
注1:最佳的染条件,因具体的胞和培条件而定,LipoFu2008(毫升):plasmid DNA(微克)的量可在6:1-18:1内自行染条件。于多个孔染相同数量相同粒的情况可以把个孔所需的LipoFu2008和DNA混合物配置在一个离心管内,混匀孵育后可分加到各个孔中。
注2:于其它培板或培器皿,各种试剂的用量可以按照胞培按比例算,具体参照表1。
注3:室温孵育15-30分,可能出絮状漂浮物,属正常象,不会影响染效率。无胞,LipoFu2008-DNA混合物全部加入后需轻轻混匀。
注4:染后5-6小不更换细胞培大多数胞无明毒性,更一些胞可以提高染效率。
于基因表达,再培24-48后即可检测转染效果;如果用于筛选稳定表达胞株,染后24-48小即可加入适当的筛选药物,例如G418等,定表达胞株的筛选