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WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)

价格：¥800 - 3500

品牌：西格

产地：进口、国产

最新更新日期：2021-07-29 17:46

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上海西格生物科技有限公司

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公司：上海西格生物科技有限公司

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产品属性

数量

英文名	ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG)

CAS号

详见说明书

保质期

详见说明书

供应商

上海西格

保存条件

低温冷藏

规格

1kit

产品说明

WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。本产品仅供科研
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

中文名称：WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)
英文名称：ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG)
产品规格：1kit
发货周期：1～3天
SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带（抗原所在位置）。
产品内容：
封闭试剂：30g(可配制400ml)。
10倍浓缩抗体稀释液，50ml。
HRP标记二抗，0.3ml，效价1:500～1000。
ECL显色液，25ml A液 + 25ml B液。
保存条件：-20℃避光密闭保存，有效期一年。若经常使用，可将封闭试剂，抗体稀释液和ECL显色液存放于 2-8℃以方便使用。
操作步骤(仅供参考)：
常规电泳转膜后：
1．清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2．按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液（pH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。
3．将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4．用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5．用TBS-T 缓冲液（PH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。
6．用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15μl HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天
再使用一次。
7．用TBS-T缓冲液（pH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次10min。
8．根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间（从5秒到30分钟）以期达到理想结果。
注意事项：
1．请根据一抗来源选择试剂盒。
2．可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3．TBS-T（0.01M，PH7.6）配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml双蒸水溶解，用盐酸调pH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）
WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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5-Benzyl-1H-tetrazole 中文名：5-苄基-1H-四唑分子式：C8H8N4O 球蛋白 IgG(IgG) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装
WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)Ciprofloxacin 中文名：盐酸环丙沙星分子式：C17H19ClFN3O3 猪胰岛素样生长因子英文名称： Porcine Insulin-like Growth Factor-1 规格： 48T/96T 英文缩写： IGF-1
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本产品仅供科研培养细胞和冰冻切片：
准备工作：缓冲液的配备
3%柠檬酸——100ml 蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7·H2O)3g,pH2.0 左右。
2×SSC——1000ml 蒸馏水中加氯化钠 17.6g，柠檬酸三钠(C6H5O7Na3·2H2O，分子量 294)8.8g。
0.5×SSC——300ml 蒸馏水加 100ml 2×SSC 即可。
0.2×SSC——270ml 蒸馏水加 30ml 2×SSC 即可。
20%甘油——20ml 甘油加 80ml 蒸馏水即可。
0.5 M PBS——1000ml 蒸馏水加氯化钠 30g,Na2HPO4·12H2O 6g,NaH2PO4·2H2O 0.4g,PH7.2-7.6。