实验原理:
基因合成是指在体外人工化学合成双链DNA分子的技术,所能合成的长度范围为50bp-12kb。与寡核苷酸的合成不同:寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段为100nt左右。
技术应用:
相对于从已有生物中获取基因来说,基因合成无需模板,因此不受基因来源的限制。全基因合成的适用范围:很难克隆的基因或cDNA;密码子优化以提高基因的表达;重组抗体;预测的基因或cDNA。基因合成有较大的灵活性,可以对基因的酶切位点和多聚接头进行修改和设计,方便下游的克隆和实验。基因合成周期短,可以保证序列100%准确无误。
实验流程:
(1) 客户提供原始序列 (2) 序列优化 (3) 基因合成 (4) 基因克隆至载体 (5) 测序鉴定
(6) 提供包含目的基因的质粒