腺病毒通用PCR试剂盒

¥2490
康朗生物
中国/上海
2021-08-01 01:25

上海康朗生物科技有限公司

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上海康朗生物科技有限公司
蔡盼
18217752821 021-61998208
shklbio@163.com
产品属性
数量大量
英文名Adenovirus(AV)
保质期一年
供应商上海康朗生物科技有限公司
保存条件负20度
规格50次
产品说明

腺病毒通用 PCR 试剂盒

Adenovirus(AV)

产品及特点

人类腺病毒(Adenovirous)是一种可广泛引起呼吸道、胃肠道、泌尿系 统及眼部等身体多个器官疾病的重要病原体,对人类健康危害较大。腺病毒血 清型 众多,目前可分为 A-G 7 个亚属,52 个血清型。因此快速灵敏检测腺病 毒具有重要意义。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒,它具有 下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增腺病毒,与其他病原没有交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。 

腺病毒通用 PCR 试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR Magic Mix 3.0

1 mL(红盖)

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄色)

试剂三

腺病毒通用 PCR 引物混合液

100 μL(白盖)

试剂四

腺病毒通用 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖)

试剂六

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输、-20℃保存,有效期一年。

自备试剂 样品 DNA。

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 腺病毒 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液而得, 样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待 用。 二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

样品管 N+2 个

PCR 阴性 对照管

标准曲线 样品管(2-7 管)

PCR Magic Mix 3.0

各 20 μL

20 μL

20 μL

腺病毒通用 PCR 引物混 合液

各2 μL

2 μL

各 2 μL

N+2 个样品 DNA 模板

各 18 μL

PCR 阴性对照(水)

18 μL

PCR 阳性对照(腺病毒通 用 PCR 阳 性 对 照 的 10000 倍稀释液)

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5min

PCR 反应

(40 个循环)

95℃

30 sec

57℃30 sec

72℃

20 sec

最后延伸72℃7 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。 对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑 制剂的感染。 

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!