| 服务名称 | 半定量PCR(逆转录PCR) |
逆转录PCR(RT-PCR、逆转录聚合酶链式反应)相关服务
RT-PCR技术简介:
反转录PCR(Reverse transcriptase PCR,RT-PCR)是一种从RNA扩增cDNA拷贝的方法。RT-PCR对于获得与克隆mRNA的5’、3’末端序列和从非常少量的mRNA样品构建大容量的cDNA文库方面都是极为灵敏与通用的方法。此外,RT-PCR还易于鉴定已转录序列是否发生突变及呈现多态性,还可用于测定基因表达的强度。我公司采用一步、二步RT-PCR法,可满足客户不同的实验要求。
样品要求:提供的样品要新鲜并尽可能多,不推荐提供RNA样品,或者提供cDNA,并尽可能详细的提供背景资料(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等)。
基本步骤:
● 模板制备:见RNA提取技术服务。
● 引物设计
客户提供上、下游引物,或者我公司提供免费的引物设计及合成(包括
RT-PCR半定量检测中的内参引物)。
● 反转录
● RT-PCR半定量分析
PCR扩增目的基因及看家基因,产物经过琼脂糖凝胶电泳后进行灰度扫描分析。
提供结果:
完整的实验操作步骤、电泳图、定量分析结果等。