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- 上海博湖生物科技有限公司
- SURE 电击感受态细胞50ul*20
¥800 - 1200
博湖
进口、国产
2021-08-06 16:04
我要认领上海博湖生物科技有限公司
韩丽君
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产品属性
产品说明
SURE 电击感受态细胞50ul*20培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
产品名称：SURE 电击感受态细胞50ul*20
规格：50ul*20
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
SURE 电击感受态细胞50ul*20注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
人间充质干细胞-脐带小鼠骨骼肌肌肉母瘤细胞，G-7细胞 P815(肥大细胞瘤细胞)硬脂酸(Standard for GC,>99%(GC))Stearic acid质量规格：Standard for GC,>99%(GC)人多发性骨髓瘤细胞;RPMI-8226 [RPMI8826]环丁砜(标准品)Sulfolane质量规格：分析标准品,≥99.8% (GC)IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人细胞裂解液 (阳性对照) 环丁砜(Standard for GC,≥99.5%(GC))Sulfolane质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)中国仓鼠卵巢细胞;CHO十四烷(Standard for GC,>99%(GC))Tetradecane质量规格：Standard for GC,>99%(GC)LTBR Others Cynomolgus 食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸三丁酯(standard for GC,>99.5%)Tributyl phosphate质量规格：standard for GC,>99.5%
rCF, 大鼠心脏成纤维细胞 A4细胞 HL-7702(肝细胞)醋酸舍莫瑞林 Sermorelin Acetate质量规格：≥98.0%人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480]磺胺嘧啶银Silver Sulfadiazine质量规格：>98%,USP31,BREPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺嘧啶银(标准品)Silver Sulfadiazine质量规格：>98%,标准品人结直肠癌细胞;T84辛伐他汀 Simvastatin质量规格：>99%,BR,细胞培养级CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛伐他汀,辛伐他丁（标准品）Simvastatin质量规格：HPLC>98%,标准品
荧光素 Fluorescein 质量规格：AR 人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)ELISA检测试剂盒Humanai-thymocyteglobulin,ATGELISAKit 96T/48T钙黄绿素 Calcein 质量规格：IND 人抗眼肌抗体(EMAb)ELISA检测试剂盒Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 96T/48T瑞氏色素 Wright's stain 质量规格：BS 人抗原处理相关转运蛋白(TAP)ELISA检测试剂盒Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit 96T/48T吉氏色素,姬姆氏色素 Giemsa stain 质量规格：BS 人抗载脂蛋白抗体A1(ApoA1)ELISA检测试剂盒Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1ELISAKit 96T/48T6-FAM, SE;6-羧基荧光素琥珀酯 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester 质量规格：0.9 人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA检测试剂盒HumanAicenomereAibody,ACA/CENPELISAKit 96T/48T6-FAM ；6-羧基荧光素 6-Carboxyfluorescein 质量规格：0.95 人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA检测试剂盒Humanai-ophoblastaibody,ATAELISAKit 96T/48T5-FAM ；5-羧基荧光素 5-Carboxyfluorescein 质量规格：>95% 人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA检测试剂盒Humanai-Histoneaibody,AHAELISAKit 96T/48T黑色素(水溶) Nigrosine water soluble 质量规格：BS 人颗粒溶素(granulysin)ELISA检测试剂盒HumangranulysinELISAKit 96T/48T黑色素(醇溶） Nigrosin alcohol soluble 质量规格：BS 人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)ELISA检测试剂盒HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2ELISAKit 96T/48T7-羟基香豆素;伞形花内酯（标准品） 7-Hydroxycoumarin 质量规格：GC≥98%，标准品人可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)Elisa检测试剂盒Humansolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit 96T/48T
SURE 电击感受态细胞50ul*20人抗型肝炎病毒抗体(ai-HCV)ELISA试剂盒规格：96T/48T 姜黄素 Curcumin 质量规格：姜黄素类化合物>95%,姜黄素>75%,去甲氧基姜黄素<20%人抗型肝炎病毒抗体(ai-HCV)ELISA试剂盒规格：96T/48T 姜黄素（标准品） Curcumin 质量规格：HPLC≥98%,标准品人抗型肝炎病毒抗体(ai-HCV)免疫试剂盒 Human ai-hepatitis C virus(HCV)aibody ELISA Kit 姜黄素（高） Curcumin 质量规格：HPLC≥97%,BR人抗胸腺细胞球蛋白(ATG)ELISA检测试剂盒Humanai-thymocyteglobulin,ATG 96T/48T 荧光素 Fluorescein 质量规格：AR人抗眼肌抗体(EMAb)ELISA检测试剂盒Humaneyemuscleaibody,EMAb 96T/48T 钙黄绿素 Calcein 质量规格：IND人抗原处理相关转运蛋白(TAP)ELISA检测试剂盒Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAP 96T/48T 瑞氏色素 Wright's stain 质量规格：BS人抗载脂蛋白抗体A1(ApoA1)ELISA检测试剂盒Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1 96T/48T 吉氏色素,姬姆氏色素 Giemsa stain 质量规格：BS人抗着丝点抗体(ACA/CENP)ELISA检测试剂盒HumanAicenomereAibody,ACA/CENP 96T/48T 6-FAM, SE;6-羧基荧光素琥珀酯 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester 质量规格：0.9人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA检测试剂盒Humanai-ophoblastaibody,ATA 96T/48T 6-FAM ；6-羧基荧光素 6-Carboxyfluorescein 质量规格：0.95人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA检测试剂盒Humanai-Histoneaibody,AHA 96T/48T 5-FAM ；5-羧基荧光素 5-Carboxyfluorescein 质量规格：>95%
SURE 电击感受态细胞50ul*20操作说明：
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。 平台客服
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