小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒

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百奥莱博
北京
2021-08-10 11:48

北京百奥莱博科技有限公司

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王欣
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产品属性
样本小鼠血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
数量839
标记物过氧化物酶
适应物种小鼠
应用用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液中IL-1α的含量
检测方法ELISA(双抗夹心法)
检测限12.5pg/ml~800pg/ml
供应商北京百奥莱博科技有限公司
规格96T
产品说明

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒在内的一系列ELISA试剂盒产品,并提供一系列相关的技术服务。


名称:小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒
编号:ZN2646
规格:96T
英文名:Mouse Interleukin-1 beta ELISA Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液中IL-1α的含量。预先包被的抗体为单克隆抗体。检测相抗体为多克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的IL-1β呈正相关。血清、血浆、细胞培养上清标本用本试剂盒所检测的 IL-1β主要是有活性的成熟蛋白质。

Interleukin-1β在免疫调节和炎症反应过程中起中心作用。类风湿、结肠炎等病症也和IL-1β的产生过多有关。IL-1α和IL-1β有25%的同源性。合成IL-1β的细胞很广泛,包括单核细胞、巨噬细胞、星形细胞、NK细胞、角化细胞、内皮细胞等。两者合成时都是31KDa的前体,经剪切后成为 17.4KDa 的成熟蛋白质。IL-1β前体在细胞内合成,并无生物学活性。被 IL-1β转化酶(ICE)剪切为成熟形态后排出到细胞外。本试剂盒所用的标准品是重组小鼠的白介素1β,总计152个*基酸,分子量17.4KDa。

检测指标:IL-1α;IL1α;IL-1 alpha
检测范围:12.5pg/ml~800pg/ml
特异性:系统和其它白介素无交叉反应
敏感性:<1pg/ml

产品组成:

组分规格数量
预包被抗小鼠IL-1α抗体的96孔板96T1板
重组小鼠IL-1α标准品(冻干)10ng/管2管
生物素标记抗小鼠IL-1α(100X)130μl1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X)130μl1管
样品稀释液30ml1瓶
抗体稀释液12ml1瓶
ABC稀释液12ml1瓶
TMB显色液10ml1瓶
TMB终止液10ml1瓶
洗涤缓冲液(25X)20ml1瓶
封板膜4张


储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
有效期: 6个月(4℃);12个月(-20℃)

需自备的仪器和试剂:
1.标准规格酶标仪。
2.自动洗板机。
3.恒温箱
4.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
5.干净的试管和Eppendof管。
6.用去离子水将25X洗涤缓冲液稀释25倍,成1X洗涤缓冲液。

参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
浓度(pg/ml)012.52550100200400800
OD值0.0630.1070.1430.2140.3900.7021.2852.092

小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒
小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒外,我公司正在打折促销以下产品:

·Cy3标记蛋白A(荧光素标记蛋白A)
编号:ZN1985
英文名称:Cy3 Conjugated Protein A
规格:100μl
保存条件:置4℃保存一年,注意避光。
试剂内容:1ml CY3 标记Protein A含1mg亲和纯化 Protein A,0.01M PBS,1%BSA,0.01%Thimerosal。
标记方法:Cy3标记采用 Bayer,E.,et al.所研究的方法。(参考文献:Bayer,E.,et al.,Meth.Enzymol.,62,308(1979)
使用方法:
Cy3标记试剂稀释液:PBS或TBS缓冲液,加入试剂级BSA至1%。
使用上述稀释液,免疫荧光法按1:50-100稀释。具体的稀释度须自己预先确定。
稀释后溶液应于当天使用,未用完的应弃置。
CY3在554nm激化,在568-574nm发射荧光,呈鲜艳红色。
注意事项:请离心后,再使用。

·PDGF-A mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN1104
英文名称:Cy3 Conjugated Protein A
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman,rat,mouse,rabbit
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.PDGF-A mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
PDGF-A的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒关键词:Mouse Interleukin-1 beta ELISA Kit,IL-1β,小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒,ZN2646
小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒
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小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒关键词:Mouse Interleukin-1 beta ELISA Kit,IL-1β,小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒,ZN2646
小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒
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小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 小鼠ELISA试剂盒

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