人ALDH2基因多态性检测试剂盒(rs671)

¥1500
Fuyuanbio弗元生物
上海
2021-08-10 13:49

弗元(上海)生物科技有限公司

我要认领
弗元(上海)生物科技有限公司
弗元生物
021-80370389
fuyuanbio@fuyuanbio.com
产品属性
数量1000
英文名MGB SNP Genotyping kit
CAS号
保质期6M
供应商弗元生物
保存条件-20
规格500T
产品说明
MGB荧光探针法SNP分型试剂盒(RS671)
货号规格目录价活动价
LEH-01-rs671-500T10ul×5001500-
LEH-03-rs671-1000T10ul×100030002600
LEH-05-rs671-2000T10ul×200060004200


产品编号:
LEH-01-rs671-500T
LEH-03-rs671-1000T
LEH-05-rs671-2000T
存储条件:
2-8 保存,有效期1周;
-20 ℃保存,有效期6个月;
避免反复冻融。
产品组分:
编号名称500T1000T2000T
ARealFAST-Probe PCR mix1.4 ml×21.7 ml×31.7 ml×6
BPrimer & Probe premix0.25 ml×20.5 ml×20.5 ml×4
CLo-ROX50×)0.1 ml×10.2 ml×10.4 ml×1
DddH2O1 ml×21 ml×31 ml×6

产品简介:
酒精代谢相关ALDH2基因多态性检测试剂盒(rs671)
本产品是基于Taqman MGB探针法开发的SNP分型试剂盒。该试剂盒具有高灵敏度、高区分度、高重复性、抗干扰性强等特征。该试剂盒包含RealFAST-Probe PCR mix Lo-ROXPrimer & Probe premix ddH2OSNP分型所需的所有试剂,具有操作简便、分析简单、结果可靠等优点。

自备耗材和设备:
μ移液器,10 μ移液器,100 - 200 μ移液器;
冰盒;
荧光定量PCR管;
实时荧光定量PCR仪。
反应设置与操作过程:
1. 探针分型:
FAM标记A型;VIC标记G型。

2. 反应体系:
PCR反应体系(10 μl):
名称体积(μl
RealFAST-Probe PCR mix5
Primer & Probe premix1
Lo-ROX50×)按机器品牌与型号添加
DNA110 - 40 ng
ddH2O补足至10 μl
仪器型号对Lo-ROX添加的要求:
仪器终浓度
ABI PRISM 7000 /7300 /7700 /7900HT /Step One5×(即:Lo-ROX 1μl /10μl体系)
ABI 7500 /7500 Fast
Stratagene Mx3000P /Mx3005P /Mx4000
1×(即:Lo-ROX 0.2μl /10μl体系)
Roche仪器;
Bio-Rad仪器;
Eppendorf仪器
无需添加
反应条件:
项目温度时间循环数
预变性95 5 min1
变性95 10 sec40
退火/延伸60 30 sec






3. 操作过程:
1.1 试剂准备:试剂盒从-20℃冰箱取出,室温融化;涡旋仪混匀,瞬时离心待用。
1.2 用量计算:根据需要检测的样本数n,配置n+1个反应体系混合液。即5(n+1)μl RealFAST-Probe PCR mix(n+1)μl Primer&Probe premix rs671)、0.2(n+1)μl Lo-ROX50×)、2.8(n+1)μl ddH2O。(若反应数较大,可适当增加几个反应
1.3 反应混合液配制:将上述计算的用量按次序用移液器加入同一新鲜干净的EP管中,涡旋仪混匀,瞬时离心。(若反应数较大,可选用较大EP管。请务必旋窝混匀!
1.4 添加反应混合液:按照每孔9μl的量将配置好的反应体系分装至八联排(96孔板)。
1.5 添加模版:1μl已经定量并稀释至10 - 40 ng/μDNA模板加入分装的反应体系中。
1.6 瞬时离心:八联排(96孔板)盖上管盖(或封膜),瞬时离心,使DNA模板与反应体系混合并处于管底。(请务必进行瞬时离心,否则可能出现无扩增的结果!
1.7 上机:将八联排(96孔板)放入ABI7500PCR仪,根据反应条件设置ABI 7500软件,开机运行。(请根据选用的机型进行相关设置
1.8 特别说明:配置体系过程中,需要戴一次性乳胶手套(PE手套);避免接触管盖(或封膜),防止污染,导致荧光信号不准确。



常见问题:
 1. 存储条件与反复冻融如何选择?
该产品-20 ℃条件下可以存储6个月;2-8 ℃可以存储1周。组分ABC均不能反复冻融,融化后不建议再次冻存。
2. 反应体系的确认?
该试剂盒建议反应体系10 μl。若必须使用其他反应体系,建议自行验证后在进行大量样本的检测。
3. 反应条件是否可以改动?
本试剂盒的反应条件根据多种参数确定,并适用于10 μl反应体系,为确保实验数据的准确性,不建议改动。
4. 机器设备的适用与选择?
该试剂盒适用于多种实时荧光定量PCR仪,但注意Lo-ROX的添加有所不同,请严格按照说明书执行。
5. 新学习的用户,常常出现无扩增?
该实验为精细实验,对操作要求较高,请注意严格按照说明书执行。尤其是加样、加样后的离心等。为提高实验成功率,可选择加倍反应体系,以20 μl体系进行初步学习。
6. 扩增曲线荧光信号很弱,或扩增曲线呈锯齿状?
这个问题可能有多种原因造成,常见原因及解决办法见下表。
原因解决办法
检测光谱设定误差不同荧光定量PCR仪的检测光谱范围有差异,根据所用的仪器型号设置检测的荧光信号范围。
荧光采集时间太短扩增曲线锯齿状较明显时,将延伸时间设定为45 - 60 sec可得到改善。
目标DNA的拷贝数过少目标DNA拷贝数只有几倍到几十倍时,容易形成线性混乱,提高样品浓度再进行反应。
样本浓度过低或严重降解更换高浓度样本或质量更好样本进行实验。

弗元生物,致力于打造具有国际影响力的生物医学品牌。

弗元生物立足于生物科技蓬勃发展的上海,与张江药谷、中科院、三甲医院等生物医学领域的各企事业单位协作紧密,共同为中国生物医学研究贡献力量。公司以干细胞与再生医学研究为核心,业务经营范围辐射到细胞生物学、分子生物学、免疫学等生物医学领域的多个相关学科。

至2019年初,公司有技术服务事业部、再生医学事业部和生命科学事业部三个主要发展部门。目前,在国际期刊杂志发表论文7篇,中文核心期刊发表论文1篇,申请国家发明专利4项,拥有商标9项;生命科学事业部,已经上市科研产品十余项,在研产品数十项;再生医学事业部,具有在研项目多项,包括间充质干细胞治疗缺氧性脑病、再生医学软骨、再生医学骨等,生物人工肝;技术服务事业部,服务了多家企业和科研机构,在再生医学的基础和转化研究上进一步完善了服务体系。