改良Lowry法蛋白定量试剂盒由上海古朵生物提供介绍,本司所供应的试剂品种齐全,满足于客户的需求,包含有:动物血清,标准品对照品,化学试剂,生化试剂,染色液,实验耗材,溶液,缓冲液,培养基,抗体,抗原,蛋白质,其他生物试剂等,我们所销售的试剂有进口试剂及国产试剂供您选择,价格实验,如有需要,欢迎订购!
中文名称:改良Lowry法蛋白定量试剂盒
英文名称:Leagene
规格:100T/500T
供应商:上海古朵
类别:蛋白检测
储存方式:室温,避光,12个月
主要用途:微板法,又称Folin-酚法,定量测定测蛋白浓度。
注意事项:利用蛋白中肽键与铜离子结合成四配位基铜离子复合物,后者与Folin试剂(福林酚)反应,产生蓝色比色物,用分光光度法(酶标仪或分光光度计)检测750nm处吸光度。
适用范围:限于科研实验,不作临床。
简介:
目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是:BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein AssayKit)和Bradford蛋白定量试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)。Leagene 改良Lowry法蛋白定量试剂盒是利用蛋白中肽键与铜离子结合成四配位基铜离子复合物,后者与Folin试剂(福林酚)反应,产生蓝色比色物,用分光光度法(酶标仪或分光光度计)检测750nm处吸光度,并与标准曲线比较,求得待测蛋白样品的浓度,在1~1500μg/ml浓度范围内有较好的线性关系
操作步骤:
1、 取1ml蛋白标准配制液加入到蛋白标准(BSA)(20mg)中,充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
2、 取适量20mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为1500μg/ml或所需浓度。如取75μl 20mg/ml蛋白标准,加入925μl稀释液,充分混匀,即配制1500μg/ml蛋白标准。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作为溶解BSA稀释液。稀释后的蛋白标准也应-20℃长期保存.
3. 根据样品数量,按Folin-Ciocalteu Reagent:ddH2O =1:1的比例配制Folin-Ciocalteu工作液,充分混匀.
4. 根据样品数量,按试剂(B1):试剂(B2):试剂(B3)比例配制改良Lowry Reagent工作液,充分混匀。例如取Lowry A、Lowry B、Lowry C,配制成改良Lowry Reagent工作液。
5. 将蛋白标准用稀释待测样品的溶液梯度稀释,浓度分别为300μg/ml、60μg/ml、12μg/ml、2.4μg/ml、0μg/ml,加到96孔板的标准品孔。
6. 加40μl待测蛋白样品或稀释液(空白对照)到96孔板的样品孔中,如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液不同,应在待测蛋白样本孔中加入稀释液;如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液相同,无需在待测蛋白样本孔中加入稀释液.
7. 用多通道微量移液器快速将200μl 配置好的改良Lowry Reagent工作液加入至各孔,立即在96孔板混匀器上混匀或手动轻轻混匀。室温准确孵育.
8. 用多通道微量移液器快速将20μl新鲜配置的Folin-Ciocalteu工作液加至上述各孔中,立即在96孔板混匀器上混匀或手动轻轻混匀。加盖以防止液体挥发,室温准确孵育
9. 轻轻混匀96孔板,酶标仪或微量滴定板读数仪测定750nm处吸光度,也可用分光光度计测定,但应考虑根据比色皿的最小检测体积,检测样品数量亦相应减少。
生物试剂的使用常识:
(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特)。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。
购买后注意事项:
1、购买后,请务必确认标签上的注意事项.
2、请严格按照产品说明书上的要求进行归范化操作。
3、在实验过程中,尽可能避免披头散发及用嘴巴去直接触碰产品。
4、在实验中遇到不懂之处,不可擅自进行违规操作,应该请教专业人员。
5、必须戴好防护用具,小心翼翼进行操作。
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