样本密度分离液

¥460
达优
2021-08-11 10:34

上海觅拓生物科技有限公司

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上海觅拓生物科技有限公司
马经理
18616635231
madod@mito-bio.com
产品属性
数量10
供应商上海觅拓
规格250ml
产品说明

【产品名称】

通用名称:样本密度分离液英文名称:Density Reagent

【型号】

样本密度分离液(A 型)样本密度分离液(B 型)

【规格】

100mL/瓶、250mL/

【预期用途】

通过密度分离作用,用于样本中不同成分的分离,以便于对样本的进一步分析。

【检验原理】

外周血中单个核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的比重与红细胞、多核白细胞及血小板不同,介于1.0751.090g/ml 之间,红细胞及粒细胞的密度较大,为1.092g/ml 左右,血小板在1.0301.035g/ml之间。因此利用样本密度分离液产生一定程度的密度梯度,将稀释后的全血平铺于分离液之上。离心后,红细胞、粒细胞比重大,沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分离液比重,漂浮于分离液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分离液液面的细胞,就可从外周血中分离到单个核细胞。

【主要组成成分】

本产品的主要成份为聚蔗糖和泛影酸。

【储存条件及有效期】

未开封室温避光保存,有效期为2 年;开封后4℃保存,保质期为 6 个月。

【样本要求】

要求血液为新鲜的抗凝血,血液收集时应无菌操作且在储存、运输、处理过程中避免冷冻。

【检验方法】

  1. 取新鲜抗凝EDTA、枸橼酸钠或肝素等抗凝剂均可全血,用等体积等渗溶液
PBS 或生理盐水)稀释全血。
  1. 在离心管中加入一定体积的分离液,将稀释后的血样平铺到分离液液面上方,保持两液面界面清晰。分离液、抗凝未经稀释全血、等渗溶液(PBS 或生理盐水)体积为1:1:1
3.室温,水平转子700-800g2000-2500rpm离心20-30min
  1. 离心结束后,管底是红细胞,中间层是分离液,最上层是血浆/组织匀浆层,血浆层与分离液层之间是一层薄较致密的白膜,即:单个核细胞(包括淋巴细胞和单核细胞)层。小心吸取白膜层到另一离心管中。
  2. 用等渗溶液(PBS、生理盐水或培养基等)稀释到一定体积,颠倒混匀。室温,水平转子250g1000rpm,离心10min 弃上清。重复洗涤1-2 次。
  3. 用等渗溶液(PBS、生理盐水或培养基等)将细胞重悬计数备用。

【检验结果的解释】

分离正常人外周血,每毫升全血可获得的单个核细胞数应0.5×106

【检验方法的局限性】

本产品的效果受储存条件、操作者的经验、样本质量等因素影响。

【产品性能指标】

本产品外观略带黄色透明液体,无沉淀、颗粒或絮状物;密度:1.077±0.001g/mL
渗透压:280-340mOsmol/kg
内毒素要求:样本密度分离液(A 型)<0.06EU/mL 样本密度分离液(B 型)<0.5EU/mL
无菌要求:无微生物检出

【注意事项】

  1. 本品应由专业人员使用,使用前应仔细阅读说明书,并做好个人卫生防护;
  2. 整个实验注意无菌操作;
  3. 从新鲜血样中分离细胞时,洗涤两到三次,避免分离液或血细胞、血小板的干扰;
  4. 混匀细胞时,请尽量吹打混匀,避免细胞成团;
  5. 试剂储存时,避免高温、低温环境及日光照射;试剂使用时请注意无菌操作;
  6. 本产品仅供体外诊断用;
  7. 有效期内使用;
  8. 废液的处理应按国家或其他相关规定进行。

【参考文献】

  1. Boyum A.. Scand J. Clin. Lab. Invest. 1968; 21, Suppl.97.
  2. Harris R. & Ukayiofo EV. Lancet. 1969; 327:7615.