凝胶迁移实验EMSA

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2021-08-11 10:47

南京医药研发与技术服务行业协会

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南京医药研发与技术服务行业协会
叶小姐
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产品属性
提供商南京医药研发与技术服务行业协会
服务名称凝胶迁移实验EMSA
产品说明

实验目的:检测待测样品中特定目的核蛋白的转录调控活性。
实验原理:蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,在琼脂糖胶或非变性胶中电泳时这种复合物比
无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白,并可通过加入特异性的抗体(supershift)来检测特定的蛋白质,进行未知蛋白的鉴定。
实验材料:
试剂:核蛋白提取试剂盒、bradford法蛋白含量测定试剂盒、生物素标记-3’端-DNA试剂盒、
Lightshift EMSA Optimization & Control Kit、化学发光法核酸检测试剂盒。
仪器:恒温培养箱、蛋白电泳仪、低温冰箱。恒温水浴箱、紫外交联灯、振荡器、脱色摇床。
实验内容与方法:
1、 核蛋白样本提取与蛋白定量。
2、 生物素标记DNA3’端并去除TdT。
3、 Super-Shift反应,配制6.5%聚丙烯酰胺凝胶,配制好各反应体系,EMSA室温结合反应20min,电泳上样。
4、 电转膜,操作方法同常规Western blot转膜操作。
5、 紫外交联,将核酸交联于PVDF膜上。
6、 化学发光法检测生物素标记的探针。
服务周期:(2到8周,根据样本数量而定)
结果提交:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数
据、图片,文本或电子版。
收费标准与付费方式:
核蛋白提取 (核蛋白提取及蛋白定量结果,100元/样)
预实验 (客户提供一抗,800元/膜)
正式实验 (客户提供一抗。1000元/膜,每张膜最多8个样)