960化工网 广州维伯鑫生物科技有限公司 猪细小病毒（PPV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法） 价 格： 询价
品 牌： 维伯鑫
最新更新日期： 2021-08-11 12:02
我要认领 公司： 广州维伯鑫生物科技有限公司
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产品说明
【产品名称】 通用名称：猪细小病毒 （ PPV ） 核酸检测试剂盒 （ 荧光 PCR法 ） Name ： Porcine Parvovirus Detection Kit （ Real-Time PCR Method ） 【包装规格】 25T / 盒 、 50 T/盒 【预期用途】 猪细小病毒 （ Porcine parvovirus, PPV ） 是引起母猪流产和新生仔猪死亡的主要病原体之一，同时也能引起某些皮肤病和腹泻 [1-2] ，严重影响猪群的健康和正常生产，己经给世界养猪业造成了很大的经济损失。本病主要表现为流产、产死胎和木乃伊胎，母猪通常不表现临床症状。实时荧光定量 PCR将常规 PCR 技术与荧光检测相结合 , 不仅具有敏感性高、特异性强、用时短等优点 , 而且通过分析软件对数据进行分析整理，结果更为准确直观 , 已成为病原体检测的重要方法 [3] 。 本试剂盒适用于检测肠系膜淋巴结、肝脏、肾、肺、肝、脑、睾丸、胎盘的肺和淋巴结、全血等样本中的猪细小病毒，用于猪细小病毒感染的辅助诊断。 【检验原理】 本试剂盒采用 TaqMan探针法实时荧光 PCR 技术，设计一对猪细小病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对猪细小病毒的 DNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。 【试剂组成】 包装规格 25T/ 盒 50T/ 盒 PPV反应液 50 0 μL× 1 管 50 0 μL× 2 管 酶液 25 μL×1管 50μL×1管 PPV 阳性质控品 50μL ×1管 50μL ×1管 阴性质控品 250μL ×1管 250μL ×1管
说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
【储存条件及有效期】 -20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。 【 适用仪器 】 ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P 、 LightCycler 、 Bio-Rad 、 Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。 【标本采集】 疑似感染仔猪取肠系膜淋巴结或肝脏；流产或死胎的肾、肺、肝、脑、睾丸和胎盘肺、淋巴结等组织；待检活猪，用注射器取血 5mL【保存和运输】 上述标本短期内可保存于 -20℃，长期保存可置 -70℃ ，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃ 冰袋运输，严禁反复冻融。 【 使用方法 】 样品处理（样本处理区） 样本前处理 组织样品：每份组织分别从 3个不同的位置称取样品约 1g ，手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中， 8000rpm 离心 2min ，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；全血样本：待血凝固后，取血清 100μL 于灭菌离心管中。 核酸 提取 推荐采用广州维伯鑫生物科技股份有限公司生产的 D NA提取试剂盒（离心柱提取法），请按照试剂盒说明书进行操作。 试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR反应管管数为 N （ N=样本数 +1 管阴性对照 +1 管阳性对照； 反应管数 每满 10 份，多配制 1份 ） ，每测试反应体系配制如下表： 试剂 PPV反应液 酶液 用量（样本数为N ） 20μL 1μL
将混合好的测试反应液分装到 PCR反应管中， 21uL/ 管。 加样（样本处理区） 将步骤 1提取的 核酸 、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。 PCR扩增（核酸扩增区） 将待检测反应管置于 荧光定量 PCR仪反应槽内； 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL； 荧光通道选择： 检测通道（ Reporter Dye） FAM ， 淬灭通道（ Quencher Dye ） NONE ， ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。 推荐循环参数设置： 步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号 1 1 cycle 95℃ 10min 否 2 40 cycles 94℃ 15sec 否 55℃ 30sec 是
【 注意事项 】 1. 所有操作严格按照说明书进行； 2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心； 3. 反应液应避光保存； 4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧； 5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服； 6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染； 7. 实验完毕后用 10%次氯酸或 75% 酒精或紫外灯处理工作台和移液器； 8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。 【参考文献】 [1] Mengeling W L. Prevalence of porcine parvovirus induced reproductive; an abattoir study [J]. Am Vet Med Assoc, 1978, 172: 1291-1294. [2] Den S. Parvovirus-like particle associated with diarrhea in unweaned piglets [J]. Can Comp Med, 1985, 49: 343-345. [3]殷 震 , 刘景华 . 动物病毒学 [M] . 2 版 . 北京 : 科学出版社 , 1997. [ 4 ] 国家质量监督检验检疫总局 . SN/T 1919-2016 猪细小病毒病检疫技术规范 [S]. 【生产企业】 企业名称： 广州维伯鑫生物科技股份有限公司 邮 编： 510663 生产地址：广州高新技术产业开发区科学城科丰路 31号 G11 栋 201 号 电子邮箱： info@vipotion.com电 话： 020-66377266 公司网址： http://www.vipotion.com传 真： 020-66377267
