人白细胞介素-4 ELISA试剂盒

产品编号：SEKH0011

适用于人血清、血浆或细胞培养上清液等样本

背景介绍：

白细胞介素(interleukin，IL)是非常重要的细胞因子家族，在调节细胞生长分化、免疫细胞的活化与分化、调节免疫应答、诱导炎症发生过程中起重要作用。目前发现的成员已达35个，被命名为IL-1～IL-35。白细胞介素-4(IL-4)主要由活化的CD4+Th2细胞产生，活化的肥大细胞等也可产生，是具有多种生物学功能的细胞因子，其经典的作用包括刺激B细胞、促使B细胞向浆细胞分化以及诱导B细胞分泌IgE；促使T辅助(Th)细胞向Th2型细胞分化，并抑制Th1型细胞产生；IL-4也是肿瘤免疫中的关键细胞因子之一，共享信号传导系统，从而将信号传导到胞浆；IL-4还可通过激活嗜酸性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞促进气道炎症，增强纤维母细胞的增殖与活化引起气道重塑，在过敏性炎症疾病中起着重要的作用。

检测原理：

Solarbio (Solarbio ®) ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗人IL-4单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的人IL-4会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗人IL-4抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的人IL-4发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的人IL-4，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450 nm（OD=450 nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的人IL-4浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中人IL-4的浓度。

注意事项：

1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。

2. 试剂盒未使用时应保存在2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。

3. 试剂盒使用前请在室温恢复30min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。

4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。

5. 为避免交叉污染，请在试验中使用1次性试管，枪头，封板膜（※）及洁净塑料容器。.

6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶盖上，

使用前请离心处理（5-10 S即可），使管壁上的液体集中在管底部，取用时，请用移液器小心吹打几次。

7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的

试剂代替本试剂盒中的某单个组分。

8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。

安全提示：

试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作人员在使用时请带上手套并注意防护；在操作过程中也要避免试剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量清水清洗；检测血液样本及其它体液样本时，请按国家生物实验室安全防护有关管理规定执行。