【预售】SELECT-m6A修饰定量检测技术

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2021-08-11 18:06

广州表观生物科技有限公司

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陈小姐
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产品说明


SELECT(single-base elongation-and ligation-based qPCR amplification method)[1] 检测技术,即单碱基延长和连接的 qPCR 扩增技术,只需三小时就能完成低丰度转录本中单碱基分辨率的 m6A 检测,无需抗体富集就能够针对性地对特定位点进行 m6A 修饰定量,样本间修饰丰度差异分析以及鉴定目标位点是否存在m6A修饰。表观生物将隆重推出多款 SELECT 检测试剂盒以及 SELECT 检测技术服务,填补市场上特定位点 m6A 常规检测技术的空白,协助研究者鉴定 m6A 相关蛋白的作用靶点,深入挖掘 m6A 修饰的作用机制,有望为RNA m6A修饰分子标志物的发现带来新突破。

技术应用
1. 检测RNA上单位点的m6A修饰
2. 检测特定m6A位点的修饰比例
3. 鉴定m6A甲基转移酶或去甲基酶的作用靶点


技术优势
1. 荧光定量PCR进行精确定量,达到单碱基分辨率
2. 无需抗体IP,无需同位素标记,降低成本,可操作性高
3. 灵敏度高,总RNA所需样本低至1μg 


技术服务送样要求
1. 总RNA,≥3μg/样本;
2. 细胞,≥2.5×105个细胞/样本


试剂盒信息


技术流程图


应用示例
1.对特定位点的m6A修饰进行定量


图1. 利用系列浓度梯度的标准品RNA制作标准曲线,
然后对总RNA中待分析m6A修饰的位点所在转录本进行定量[1]


图2. 利用系列浓度梯度的已知m6A成分标准品制作标准曲线,
然后对特定位点上的m6A修饰成分进行定量[1]


2.鉴定m6A修饰相关蛋白(甲基化酶、去甲基化酶、识别蛋白等)的靶点


图3. SELECT分析 lncRNA MALAT1和以及METTL3+/-细胞(对照组)的m6A2515和A2511(input对照)位点,荧光扩增曲线和qPCR CT值柱状图显示lncRNA MALAT1的2515位点是METTL3的一个靶点[1]



参考文献
[1] Xiao Y, Wang Y, Tang Q, et al. An Elongation- and Ligation-Based qPCR Amplification Method for the Radiolabeling-Free Detection of Locus-Specific N6 -Methyladenosine Modification. Angew Chem Int Ed Engl. 2018 Dec 3;57(49):15995-16000.