EB病毒(EBV)核酸扩增检测试剂盒(荧光PCR法)

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2021-08-12 09:27

广州维伯鑫生物科技有限公司

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产品说明
【产品名称】
通用名称:EB病毒(EBV)核酸扩增检测试剂盒(荧光PCR)
Name Epstein-Barr Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
【包装规格】25T/50T/

【预期用途】
EB病毒(Epstein-Barr Virus, EBV),又称人类疱疹病毒4型(Human herpes virus 4HHV-4),是1964EpsteinBarr在研究非洲儿童淋巴瘤(BL)时,从瘤细胞培养发现的一种病毒,是传染性单核细胞增多症的病原,并与BL和鼻咽癌有关。EBV流行广泛,80-90%成人发生过EBV感染。幼儿感染后多数无明显症状,或引起轻度咽炎和上呼吸道感染,约有50%出现传染性单核细胞增多症。病毒主要通过唾液传播,也可因输血传染。感染后EBV可能现在口咽部上皮细胞增殖,然后病毒感染局部黏膜的B细胞,这些细胞进入血液循环而造成全身性EBV感染[1-2]
本试剂盒适用于检测血清等样本中的EB病毒,用于EB病毒感染的辅助诊断。
【检验原理】
本试剂盒根据EB病毒基因设计特异性的引物和探针[2-3],用荧光PCR技术对EB病毒的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

【试剂组成】
包装规格25T/50T/
酶液 500μL×1 500μL×2
EBV反应液25μL×1 50μL×1
EBV阳性质控品 50μL ×1 50μL ×1
阴性质控品 250μL ×1 250μL ×1
注:
1)不同批号试剂不能混用。
2)试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。

【储存条件及有效期】-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次,有效期12个月。

适用仪器ABI 、安捷伦MX3000P/3005PLightCyclerBio-Radeppendorf等系列荧光定量PCR检测仪。

【标本采集】疑似感染病人的静脉血2mLEDTA-2Na抗凝管

【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。

使用方法
  1. 样品处理(样本处理区)
  1. 样本前处理
2000rpm离心5min,取上清液100μL1.5mL灭菌离心管中
1.2核酸提取
推荐采用广州维伯鑫生物科技股份有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,请按照试剂说明书进行操作。
  1. 试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数,设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照;反应管数每满10份,多配制1),每测试反应体系配制如下表:
试剂EBV反应液酶液
用量(样本数为N20μL1μL
将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中,21uL/管。
  1. 加样(样本处理区)
将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
  1. PCR扩增(核酸扩增区)
  1. 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;
  2. 设置好通道、样品信息,反应体系设置为25μL
荧光通道选择:检测通道(Reporter DyeFAM, 淬灭通道(Quencher DyeNONEABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光,选择None即可。注意事项
1.所有操作严格按照说明书进行;
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;
3.反应液应避光保存;
4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

【参考文献】
[1] Himmelfrb J, Hakim BM. Biocompatibility and risk of infection in hemo-
dialysis patient [J]. Nephrol Dial Transplant, 1994, 9(1): 134-144
[1]黎庆梅, 陈辉, 庄碧英. 实时荧光定量PCREB病毒DNA检测中的应用[J].国际检验医学杂志, 2011.
[2]曾刚毅, 唐孝亮, 钟海军.实时荧光定量PCR法检测鼻咽癌患者血浆游离EB病毒DNA的临床应用[S].检验医学与临床, 2008.

【生产企业】
企业名称:广州维伯鑫生物科技股份有限公司编:510663
生产地址:广州高新技术产业开发区科学城科丰路31G11201
电子邮箱:info@vipotion.com话:020-66377266
公司网址:http://www.vipotion.com真:020-66377267