EASYspin全血RNA快速提取试剂盒(Dnase I)

¥1190
YANJIN
国产/进口
2021-08-12 09:45

上海研谨生物科技有限公司

我要认领
上海研谨生物科技有限公司
杨芳萍
13585717991 021-65232515
yanjinbio@163.com
847724139
产品属性
保存条件低温
保质期见产品包装
数量500
供应商上海研谨生物
规格50次
产品说明

产品名称:[EASYspin全血RNA快速提取试剂盒(Dnase I)]

货号

产品名称

规格

价格(元)

YRA101-01

TRzol(动物总RNA提取试剂)(红)

50ml

360

YRA101-02

TRzol(动物总RNA提取试剂)(红)

100ml

580

YRA101-11TRzol(植物总RNA提取试剂)(无色)50ml360
YRA101-12TRzol(植物总RNA提取试剂)(无色)100ml580
YRA102-01Trzol LS(液体样本RNA抽提试剂)100ml690
YRA103-01RNApure超纯总RNA快速提取试剂盒(Dnase I)20次440
YRA103-02RNApure超纯总RNA快速提取试剂盒(Dnase I)50次890
YRA104-01EASYspin全血RNA快速提取试剂盒(Dnase I)50次1190
YRA105-01EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒(Dnase I)50次1090
YRA106-01EASYspin植物RNA快速提取试剂盒(Dnase I)20次550
YRA106-02EASYspin植物RNA快速提取试剂盒(Dnase I)50次1190
YRA107-01PLANTaid 植物RNA助提剂10ml100
YRA108-01病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒50次1020
YRA109-01RNAclean RNA清洁纯化试剂盒50次600
YRA110-01RNAfixer无液氮RNA样品储存液100ml450
YRA111-01RNAsafe高效Rnase灭活剂1ml×5680
YRA112-01Acryl Carrier核酸助沉剂1ml100
YRA113-01RNAlong RNA长期保存液1ml85
YRA114-01RNase/DNase-free纯水100ml100
YRA114-02RNase/DNase-free纯水500ml360
YRA115-01RNaseAway即用型强力RNase灭活剂100ml250
EASYspin组织/细胞RNA 快速提取试剂盒
EASYspin RNA Rapid Tissue and cell Kit

产品信息:





试剂盒组成保存

保存条件:本试剂盒在室温储存12 个月不影响使用效果。
产品介绍:

独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA 酶,然后用乙醇调节结
合条件后,RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free H20 将纯净RNA 从硅基质膜上洗脱。
自备试剂:乙醇, β-巯基乙醇
注意事项:

1.需要自备一次性注射器,研钵。RA105 EASYspin 组织细胞RNA快速提取试剂盒
-MBI2.裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3.关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本公司的EASYspin 系列RNA 提取产品,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的
mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
  1. 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
  2. 选择基因组DNAcDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
  3. 操作步骤:

提示:

ð第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!
ð操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1mlRLT中加入10μlβ-
巯基乙醇。此裂解液建议现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。
  1. 组织培养细胞
    1. 收集<107悬浮细胞到一个1.5ml离心管,对于贴壁细胞,孔板培养可以直接裂解,细胞瓶培养应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。
    2. 2,000rpm离心10 sec或者300g离心5 min,使细胞沉淀下来。完全吸弃上清,留下细胞团,注意不完全弃上清会稀释裂解液导致产量纯度降低。
    3. 轻弹管壁将细胞沉淀完全松散重悬加入350μl<5x106细胞或者600μl
5x106-1x107 细胞)裂解液RLT,吹打混匀后用手剧烈振荡20 sec,充分裂解。
    1. 用带钝针头的一次性1ml(0.9mm针头) 注射器抽打裂解物5-10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30sec),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
    2. 操作步骤项下3
  1. 动物组织(例如鼠肝脑)
    1. 电动匀浆:新鲜组织用解剖刀迅速切成小碎块, 加入350μl(<20mg组织) 或者
600μl(20-30mg 组织)的裂解液RLT 后电动彻底匀浆20-40 sec
    1. 液氮研磨+匀浆:在液氮中研磨组织成细粉后,取适量组织细粉(20mg/30mg)转入装有350μl/600μl组织裂解液RLT1.5ml离心管中, 用手剧烈振荡20sec,充分裂解。用带钝针头的一次性1ml(0.9mm针头) 注射器抽打裂解物10次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30sec),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
    2. 将匀浆后裂解物12,000rpm离心3min,沉淀可能存在的裂解困难的碎片或者不溶物,
将裂解物上清小心转到一个新离心管。
    1. 操作步骤项下3
  1. 较精确估计裂解物(上清)体积,加入等体积的70%乙醇(请先检查是否已加入无水乙醇!,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
  2. 立刻将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA 中,吸附柱放入收集管中)12,000rpm离心60sec,弃掉废液。
  3. 350μl去蛋白液RW1,室温放置30sec12,000rpm离心30sec,弃掉废液。将吸附柱RA放回收集管中。
  4. DNaseI工作液的配制:取10μlDNaseI储存液放入新的RNase-free离心管中,加入
70μl RDD 溶液,轻柔混匀。
  1. 向吸附柱RA中央加入80μlDNaseI工作液,室温放置15min一般情况下室温放置可得到较好的消化效果,如果室温效果不佳可选择在37℃放置 15min
  2. 350μl去蛋白液RW1,室温放置30sec12000rpm离心30sec,弃掉废液。将吸附柱RA 放回收集管中。
  3. 加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!12,000rpm离心30sec弃掉废液。加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
  4. 将吸附柱RA放回空收集管中,12,000rpm离心2min,将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  5. 取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位30-50μlRNasefreewater 事先在65℃水浴中加热效果更好,室温放置1 min
12,000rpm 离心1 min