产品名称:[EASYspin全血RNA快速提取试剂盒(Dnase I)]
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) |
YRA101-01 | TRzol(动物总RNA提取试剂)(红) | 50ml | 360 |
YRA101-02 | TRzol(动物总RNA提取试剂)(红) | 100ml | 580 |
| YRA101-11 | TRzol(植物总RNA提取试剂)(无色) | 50ml | 360 |
| YRA101-12 | TRzol(植物总RNA提取试剂)(无色) | 100ml | 580 |
| YRA102-01 | Trzol LS(液体样本RNA抽提试剂) | 100ml | 690 |
| YRA103-01 | RNApure超纯总RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 20次 | 440 |
| YRA103-02 | RNApure超纯总RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 50次 | 890 |
| YRA104-01 | EASYspin全血RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 50次 | 1190 |
| YRA105-01 | EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 50次 | 1090 |
| YRA106-01 | EASYspin植物RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 20次 | 550 |
| YRA106-02 | EASYspin植物RNA快速提取试剂盒(Dnase I) | 50次 | 1190 |
| YRA107-01 | PLANTaid 植物RNA助提剂 | 10ml | 100 |
| YRA108-01 | 病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒 | 50次 | 1020 |
| YRA109-01 | RNAclean RNA清洁纯化试剂盒 | 50次 | 600 |
| YRA110-01 | RNAfixer无液氮RNA样品储存液 | 100ml | 450 |
| YRA111-01 | RNAsafe高效Rnase灭活剂 | 1ml×5 | 680 |
| YRA112-01 | Acryl Carrier核酸助沉剂 | 1ml | 100 |
| YRA113-01 | RNAlong RNA长期保存液 | 1ml | 85 |
| YRA114-01 | RNase/DNase-free纯水 | 100ml | 100 |
| YRA114-02 | RNase/DNase-free纯水 | 500ml | 360 |
| YRA115-01 | RNaseAway即用型强力RNase灭活剂 | 100ml | 250 |
EASYspin组织/细胞RNA 快速提取试剂盒
EASYspin RNA Rapid Tissue and cell Kit
产品信息:
试剂盒组成保存
保存条件:本试剂盒在室温储存12 个月不影响使用效果。
产品介绍:
独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA 酶,然后用乙醇调节结
合条件后,RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free H20 将纯净RNA 从硅基质膜上洗脱。
自备试剂:乙醇, β-巯基乙醇
注意事项:
1.需要自备一次性注射器,研钵。RA105 EASYspin 组织细胞RNA快速提取试剂盒
-MBI2.裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。 3.关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本公司的EASYspin 系列RNA 提取产品,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的
mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:- 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
- 选择基因组DNA和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
- 操作步骤:
提示:
ð第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!
ð操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1mlRLT中加入10μlβ-
巯基乙醇。此裂解液建议现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。- 组织培养细胞
- 收集<107悬浮细胞到一个1.5ml离心管,对于贴壁细胞,孔板培养可以直接裂解,细胞瓶培养应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。
- 2,000rpm离心10 sec(或者300g离心5 min),使细胞沉淀下来。完全吸弃上清,留下细胞团,注意不完全弃上清会稀释裂解液导致产量纯度降低。
- 轻弹管壁将细胞沉淀完全松散重悬,加入350μl(<5x106细胞)或者600μl
(5x106-1x107 细胞)裂解液RLT,吹打混匀后用手剧烈振荡20 sec,充分裂解。- 用带钝针头的一次性1ml(配0.9mm针头) 注射器抽打裂解物5-10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30sec),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
- 接操作步骤项下3。
- 动物组织(例如鼠肝脑)
- 电动匀浆:新鲜组织用解剖刀迅速切成小碎块, 加入350μl(<20mg组织) 或者
600μl(20-30mg 组织)的裂解液RLT 后电动彻底匀浆20-40 sec。- 液氮研磨+匀浆:在液氮中研磨组织成细粉后,取适量组织细粉(20mg/30mg)转入装有350μl/600μl组织裂解液RLT的1.5ml离心管中, 用手剧烈振荡20sec,充分裂解。用带钝针头的一次性1ml(配0.9mm针头) 注射器抽打裂解物10次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30sec),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。
- 将匀浆后裂解物12,000rpm离心3min,沉淀可能存在的裂解困难的碎片或者不溶物,
将裂解物上清小心转到一个新离心管。 - 接操作步骤项下3。
- 较精确估计裂解物(上清)体积,加入等体积的70%乙醇(请先检查是否已加入无水乙醇!),此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
- 立刻将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA 中,(吸附柱放入收集管中)12,000rpm离心60sec,弃掉废液。
- 加350μl去蛋白液RW1,室温放置30sec,12,000rpm离心30sec,弃掉废液。将吸附柱RA放回收集管中。
- DNaseI工作液的配制:取10μlDNaseI储存液放入新的RNase-free离心管中,加入
70μl RDD 溶液,轻柔混匀。- 向吸附柱RA中央加入80μlDNaseI工作液,室温放置15min(一般情况下室温放置可得到较好的消化效果,如果室温效果不佳可选择在37℃放置 15min)。
- 加350μl去蛋白液RW1,室温放置30sec,12,000rpm离心30sec,弃掉废液。将吸附柱RA 放回收集管中。
- 加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm离心30sec,弃掉废液。加入500μl漂洗液RW,重复一遍。
- 将吸附柱RA放回空收集管中,12,000rpm离心2min,将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
- 取出吸附柱RA,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μlRNasefreewate(r 事先在65℃水浴中加热效果更好),室温放置1 min,
12,000rpm 离心1 min。