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- 布尼亚病毒(BV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
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维伯鑫
2021-08-12 10:32
我要认领广州维伯鑫生物科技有限公司
严老师
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产品说明
【产品名称】商品名称：布尼亚病毒(BV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) Name ：Bunyavirus Detection Kit (Real-Time PCR Method)【包装规格】25T/盒、50T/盒【预期用途】布尼亚病毒（Bunyavirus）是1943年在非洲乌干达西部布尼亚姆韦拉地区研究黄病毒时发现的新病毒。布尼亚病毒在世界上分布最为广泛，该科病毒可在任何有人居住的陆地上发现，可广泛感染节肢动物、植物和包括人类的哺乳动物，多数病毒可被节肢动物、啮齿动物媒介传播，并在自然界中以吸血节肢动物和易感脊椎动物为宿主进行循环[1-2]。本试剂盒适用于检测的组织（心、肝、脾、肺、肾、脑）和血液等标本中布尼亚病毒RNA，适用于布尼亚病毒感染的辅助诊断。【检验原理】本试剂盒对布尼亚病毒基因设计特异性引物和探针，用一步法荧光RT-PCR技术对布尼亚病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。【试剂组成】| 包装规格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
| BV反应液 | 500μL×1管 | 500μL×2管 |
| 酶液 | 25μL×1管 | 50μL×1管 |
| BV阳性质控品 | 50μL ×1管 | 50μL ×1管 |
| 阴性质控品 | 250μL ×1管 | 250μL ×1管 |
注：1）不同批号试剂不能混用。2）试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。【储存条件及有效期】-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月。【适用仪器】ABI 、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪。【标本采集】病死或捕杀动物组织（心、、肝、脾、肺、肾、脑）2g；待检活物抽取全血2ml。【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。【使用方法】- 样品处理（样本处理区）
- 样本前处理
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.2g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；全血样品待血凝后取血清100μL，置1.5mL离心管中。1.2核酸提取推荐采用广州维伯鑫生物科技股份有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。- 试剂配制（试剂准备区）
根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；反应管数每满10份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中，21uL/管。- 加样（样本处理区）
将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。- PCR扩增（核酸扩增区）
- 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；
- 设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；荧光通道选择：
检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可。【注意事项】1.所有操作严格按照说明书进行；2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；3.反应液应避光保存；4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。【参考文献】[1] 刘雅婷, 张文超, 李正跃, 等.布尼亚病毒科全基因组序列比对分析[J].云南农业大学学报, 2008, 23 (3) :315-320.[2]王颖, 邵柏, 于长友, 等. 布尼亚病毒科概述[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2012 , 23 (2) :182-184.【生产企业】企业名称：广州维伯鑫生物科技股份有限公司邮编：510663生产地址：广州黄埔区科丰路31号华南新材料创新园G11栋201号电子邮箱：info@vipotion.com电话：020-66377266公司网址：http://www.vipotion.com传真：020-66377267 
