碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)
产品简介：
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶，广泛分布于哺乳动物组织内，其活性所需最适pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜)，如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮，还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌的细胞膜。碱性磷酸酶检测试剂盒(PNP微板法)(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP比色法，其检测原理是Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物，在酸性条件下，可在碱性磷酸酶的作用下生成p-nitrophenol。在碱性条件下p-nitrophenol转变成醌式结构，呈较深的黄色，产物黄色越深，说明碱性磷酸酶活性越高，反之则酶活性越低，通过分光光度比色法测定400～415nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出碱性磷酸酶活性水平。该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的碱性磷酸酯酶活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)注意事项：
1、 待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。
2、 建议每次测定时都做标准曲线，以使标准更准确，另外标准品需避免反复冻融。
3、 如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但应考虑根据比色杯的最小检测体积，尽量采用小体积的比色杯。
4、 所测样本的值高于标准曲线的上限，应用ALP Assay buffer稀释样品后重新测定。
5、 一支显色工作液配制后需当日使用完毕，因此请注意适当多准备一些样品一起检测。
6、 p-nitrophenol溶液对人体有害，反应终止液有腐蚀性，请小心操作。
7、 如果希望进行酶活性的绝对定量，进行酶反应时应精确计时，此时推荐采用孵育30min或更长时间，以减小操作过程中的时间误差。
8、 待测样品中碱性磷酸酶活性较低时，可适当延长孵育时间至30min。
9、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
