A.蛋白质裂解
B.个性化EMSA探针合成
C.凝胶迁移率实验及化学发光、曝光处理
质粒/病毒载体等哺乳细胞转染成功案例
客户:二军大某实验室
做转染实验通常质粒终浓度从5ng/uL-20ng/uL 比较合适。但实际情况需根据细胞柱,细胞
数量不等和转染试剂不同来调配,终浓度范围可大至从0.2-40ng/uL都可。配合高效转染试
剂,如SIGMA的ESCORTTMIII Transfection Reagent 时,使用6孔细胞培养板,每孔只需加入
1ugDNA即可。通常转染试剂质量和质粒质量要求比例为1:1(m/m),如5ug质粒和5ug转染
试剂混匀。
如下[图1]所示 1mL RPMI1640/293T细胞的转染质粒终浓度为11ug/mL。
先用50uL转染试剂(调配好)和50uL质粒(223ug/mL)混匀共育,得到100uL 转染液(约
110ug/mL)。再将其加入0.9mL RPMI1640液当中,得到终浓度为11ug/mL的转染液。转染效
率好于低浓度转染(2ug/mL)[图2]。