CRISPR/Cas9技术是一项崭新的分子生物学技术,它利用细菌的免疫防御机制中的Cas9核酸内切酶，能特异性地利用一小段gRNA，在特异的位点打断目标基因的DNA，进而在该位点进行DNA操作，如Knock- out、Knock-in或点突变。根据Cas系统的作用原理，可利用其进行真核生物基因组改造。即在靶向DNA上实现特定位点的剪切，在剪切后的修复过程中会引入靶向DNA序列的突变，从而实现基因组改造的目的。

Cas9基因敲除系统构建服务
一、服务流程：
1、 与客户协商根据靶序列设计RNA序列；
2、 构建Cas9载体、RNA合成、PCR目的基因靶序列。
3、 测活性，向客户报告并送交Cas9 mRNA和gRNA 。
4、 如需要，继续做大、小鼠单细胞胚胎注射。
5、 如需要，鉴定F0嵌合鼠、繁育F1杂合基因敲除鼠。

二、我们的特点： 
1、 自主研发的生物信息学自动化设计系统,gRNA序列的选择瞬间完成，且脱靶位点极低。
2、 Cas9蛋白是经过特定改造的，其剪切能力受到了控制，能够在保证成功率的基础上极大地降低脱靶剪切的能力；优化的体外转录gRNA浓度可达2000ng/ul，十倍于其他同行产品；Cas9 mRNA有增强的Kozak序列和优化的真核codon，确保高效翻译。
3、 用斑马鱼或细胞对Cas9活性进行测试，确保有效。 
4、 从设计、构建、测活，到完成有活性的Cas9 gRNA和mRNA，全程只需15个工作日(其他同行需要2月)。
5、 如客户需要，生成F0鼠之后，可回交野生型繁育出F1，并对可能脱靶位点测序，极大程度排除脱靶概率。