非变性组织/细胞裂解液
产品简介：非变性组织/细胞裂解液内含非离子型去垢剂，能裂解 细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。 非变性条件下的裂解蛋白产物很大限度地保留了蛋白的特性和功 能，如抗原-抗体结合或酶学活性，因此适宜于进行免疫共沉淀。 另外，有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非 变性蛋白的抗原位点，这种情况应该使用非变性裂解。 储存：4 ºC避光。
非变性组织/ 细胞裂解液使用说明书
货号：R0030
规格：100ml，本产品配有一支 PMSF（1.5ml）
保存：4℃保存，有效期 1 年，长期保存可置于-20℃。
产品简介：
非变性组织/细胞裂解缓冲液内含非离子型去垢剂，能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性
膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物很大限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合或酶
学活性，因此适宜于进行免疫共沉淀。另外，有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性
蛋白的抗原位点，这种情况应该使用非变性裂解。
使用说明：
根据使用量，取每 1ml 裂解液加入 10ul PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现
加） 。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞： 去除培养液， 用 PBS、 生理盐水或无血清培养液洗一遍。 按照 6 孔板每孔加入 150-250ul
裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触，冰上放置裂解 5-10 分钟。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞加入 150-250 微升裂解
液的比例加入裂解液，冰上放置裂解 5-10 分钟。期间可以用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明
显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂
解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用
量) 。 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理：
充分裂解后，将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、Western 和
免疫沉淀、免疫共沉淀等操作。
注意事项：
为取得 佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。裂解样品的所有步骤都需在
冰上或 4℃进行。裂解时间可根据实验要求进行优化处理。
非变性蛋白裂解液裂解得到的蛋白样品， 可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。 由于含有较高
浓度的 Triton X-100 等干扰物质，不能用 Bradford 法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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参考文献：
《Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation》 作者:XIN-BIN GUO,XIN DENG,YING WEI 期刊:Wiley Online Library 影响因子: PMID:29139175
《Pro-apoptotic effect of TRAIL-transfected endothelial progenitor cells on glioma cells》 作者:Xin Deng,Wen Zhao,Laijun Song,Wei Ying,Xinbin Guo 期刊:Oncology Letters 影响因子:0.237 PMID:29545899
《Lipopolysaccharide from Escherichia coli stimulates osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells through Wnt/β‐catenin–induced TAZ elevation》 作者:Yixiao Xing, Yunpeng Zhang, Linglu Jia, Xin Xu 期刊:Molecular Oral Microbiology 影响因子:2.925 PMID:30387555
《Long non‐coding RNA MALAT1 regulates angiogenesis following oxygen‐glucose deprivation/reoxygenation》 作者:Chengya Wang, Youyang Qu, Rui Suo, Yulan Zhu 期刊:Journal of Cellular and Molecular Medicine 影响因子:4.658 PMID:30784209
《Ginkgolic acids induce HepG2 cell death via a combination of apoptosis, autophagy and the mitochondrial pathway》 作者:Qian?Ming Qi ,Yin?Cun Xue, Jian Lv, Di Sun ,Jian?Xin Du ,Sheng?Qiang Cai, Yun?He Li ,Tian?Cun Gu, Mu?Bing Wang 期刊:Oncology Letters 影响因子:1.664 PMID:29725398
"《Inactivated Tianjin strain, a novel genotype of Sendai virus, induces apoptosis in HeLa, NCI-H446 and Hep3B cells》 作者:Jun Chen, Han Han, Bin Wang, Liying Shi 期刊:Oncology
Letters 影响因子:1.664 PMID:27347098"
《Corrigendum: HAX-1 Protects Glioblastoma Cells From Apoptosis Through the Akt1 Pathway》 作者:Xin Deng, Laijun Song, Wen Zhao， Ying Wei and Xin-bin Guo 期刊:Cell. Neurosci. 影响因子:4.289 PMID:30766479
《Expression Profiles Analysis and Functional Characterization of MicroRNA‐660 in Skeletal Muscle Differentiation》 作者:B Yue, J Wu, Y Wang, C Zhang 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影响因子:3.062 PMID:28106300
《MicroRNA-197 inhibits cell proliferation by targeting GAB2 in glioblastoma》 作者:Li?Qiang Tian, En?Qin Liu, Xi?De Zhu, Xin?Gong Wang, Jian Li, Guang?Ming Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.922 PMID:27035789
《CtBP2可通过c-Myc信号传导促进前列腺癌细胞增殖》 作者:昌文张诏郜勇徐志宏张 期刊:基因 影响因子:7.463 PMID:
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu, Yubing Liang, Yong Xiao, Jing Lv, Ruicong Guan, Fei Xiao, Yubo Xie, and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影响因子:3.208 PMID:30858699
《Erythropoietin helix B surface peptide modulates miR-21/Atg12 axis to alleviates cardiomyocyte hypoxia-reoxygenation injury》 作者:Song Huang, Yongluan Lin, Zhanbo Liang, Zhuomin Wu,Yequn Chen and Chang Chen 期刊:American Journal of Translational Research 影响因子:3.266 PMID:31105848
《Examination of Alzheimer's disease by a combination of electrostatic force and mechanical measurement》 作者:W. ZHAO W. CUI S. XU L.‐Z. CHEONG C. SHEN 期刊:Journal of Microscopy 影响因子:1.813 PMID:31038737
"《The Proangiogenic Roles of Long NonCoding RNAs Revealed by RNA-Sequencing
Following Oxygen-Glucose Deprivation/ReOxygenation》 作者:Chengya Wang ,Youyang Qu ,Di Wang ,Yulan Zhu 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影响因子:5.5 PMID:30921509"
《miR?27b?3p and miR?607 cooperatively regulate BLM gene expression by directly targeting the 3'?UTR in PC3 cells》 作者:Yinglian Chen, Jiafu Zhao ,Zhiqiang Duan ,Ting Gong ,Wei Chen, Sainan Wang ,Houqiang Xu 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.851 PMID:30957187
《Glycyrrhetinic Acid Improves Insulin-Response Pathway by Regulating the Balance between the Ras/MAPK and PI3K/Akt Pathways》 作者:Yuan Zhang, Shengnan Yang, Man Zhang, Zhihua Wang, Xin He, Yuanyuan Hou and Gang Bai 期刊:Nutrients 影响因子:4.171 PMID:30871060
