Von Kossa硝酸银法钙盐染色试剂盒说明书

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2021-08-16 12:50

上海研生实业有限公司

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上海研生实业有限公司
王经理
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shyssw@126.com
产品属性
数量47
CAS号详见说明书
保质期详见说明书
供应商上海研生
保存条件低温冷藏
规格100ml
产品说明
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:Von Kossa硝酸银法钙盐染色试剂盒说明书
英文名称:
产品规格:100ml

发货周期:1~3天
钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物。

钙盐染色试剂盒采用VonKossa硝酸银法,该试剂盒采用金属置换法,硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银所置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银。
该法适用于大量样本的钙盐组织染色。
储存条件室温避光保存。
有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 咪唑并[1,2-a]啶HBsAg WB, dipstick / strip (min order 1000)

 亮叔酯盐盐HCG (intact), human serum only (human chorionic Gonadotropin)
 2-吗啉HCG (total), beta (human serum)
 DL-二苏糖醇HCG (visual) Elisa
 富马单酯hCG beta (beta-human Chorionic Gonadotropin)
 2--3-酯hCG beta, free Elisa
 4-吲哚-3-HCG Elisa (serum)
 反式-4-(叔氧羰)羧HCG, (dipstick) Quickstick (FDA) min. 500 tests
 1,3-双(2-异-2-)HCG, (midstream) (FDA) (25 tests per kit) min. 500 tests
 3--2-嗪酯HCG, (Quickcard) (FDA) (25 tests per kit) min. 500 tests
Von Kossa硝酸银法钙盐染色试剂盒说明书二一肟(>98%,BR)英文名(EN)Iodine trichloride特价促销 规格(SP)25G

二异(>98%,BR)英文名(EN)Superoxide Dismutase from human erythr...特价促销 规格(SP)1KU
伐地考昔英文名(EN)Blue Sepharose? CLB特价促销 规格(SP)25ML
伐地非d5英文名(EN)Pimaricin特价促销 规格(SP)25MG
伐地非二盐英文名(EN)Urease from Canavalia ensiformis (Jack...特价促销 规格(SP)20KU
伐地非三水合盐盐英文名(EN)Fibronectin from plasma特价促销 规格(SP)0.5MG
伐地非三水合盐盐(标准品)英文名(EN)Nicotinic acid特价促销 规格(SP)25G
伐伦克林βD葡萄糖苷英文名(EN)Ribonuclease Inhibitor特价促销 规格(SP)2.5KU
伐昔洛韦质F英文名(EN)Con A Sepharose 4B特价促销 规格(SP)25ML
法罗培南()(2.5水)英文名(EN)Propyl 4hydroxybenzoate sodium salt特价促销 规格(SP)500G
法罗培南(标准品)英文名(EN)PhenylSepharose 6 Fast Flow,low sub特价促销 规格(SP)50ML
法莫替英文名(EN)QAE Sephadex? A5特价促销 规格(SP)25G
法莫替(标准品)英文名(EN)5Bromochloroindolyl phosphate d...特价促销 规格(SP)100MG
法莫替相关化合物A盐盐英文名(EN)Fast Garnet GBC sulfate salt特价促销 规格(SP)1G
法莫替相关化合物B英文名(EN)Brilliant Green特价促销 规格(SP)5G
番茄红素(标准品)英文名(EN)Q Sepharose? High Performance特价促销 规格(SP)50ML
番茄(标准品)英文名(EN)Deoxyribonucleic acid sodium salt from...特价促销 规格(SP)250MG
番石榴苷(标准品)英文名(EN)Wheat germ oil特价促销 规格(SP)100ML
操作步骤(仅供参考):
1、Von Kossa硝酸银法钙盐染色试剂盒说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。