大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒

¥800 - 4500
上海博湖
进口、国产
2021-08-16 17:13

上海博湖生物科技有限公司

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韩丽君
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产品属性
品系详见说明书
ATCC NumberRat Eye PrimaCell:Normal Lens Epithelial Cells
细胞类型详见说明书
肿瘤类型详见说明书
CAS号详见说明书
供应商上海博湖
数量37
注册证号详见说明书
英文名详见说明书
生长状态贴壁/悬浮
年限详见说明书
运输方式常温运输/干冰运输
器官来源详见说明书
是否是肿瘤细胞详见说明书
细胞形态上皮样/成纤维样/其它
免疫类型详见说明书
物种来源人/小鼠/大鼠/其他
相关疾病详见说明书
组织来源详见说明书
规格详见说明书
产品说明
公司生产的大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒质量佳,发货速度快,售后有保证。可支持各大院校先发货
细胞描述
大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒晶状体位于玻璃体前侧,周围接睫状体,呈双凸透镜状。其中,哺乳动物晶状体细胞包括两种类型:晶状体纤维细胞和晶状体上皮细胞。单层上皮细胞覆盖在纤维前表面。眼睛晶状体的正常发育需要晶状体上皮细胞不断地分化,成熟。眼球液体中的生长因子将促进晶状体上皮细胞分化。表皮生长因子促进有丝分裂,成纤维细胞生长因子,胰岛素生长因子和胰岛素促进它的迁移和分化。利用本公司试剂盒中提供的晶状体组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的晶状体组织能使得晶状体组织中上皮细胞的一些功能特性发生改变,从而将成骨细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养大鼠晶状体上皮细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的晶状体上皮细胞。本试剂盒包含:1OptiTDSTM大鼠晶状体上皮细胞组织解离液(3×1ml2)大鼠晶状体上皮细胞组织处理缓冲液(100ml3FibrOutTM大鼠晶状体上皮细胞成纤维抑制剂(1ml500X))4)大鼠晶状体上皮组织洗液(5 x 100 ml5)大鼠晶状体上皮细胞生长因子(1ml500X)及血清(5x10ml6)大鼠晶状体上皮细胞基础培养基(5 x 100ml7)大鼠晶状体上皮组织预备液(1 x 100 ml8)大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒使用说明书

细胞传代:
大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒1. 显微镜下观察细胞,神经干细胞悬浮成神经球生长,通常情况下,每两天换液一次,每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟,收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶,在超净工作台中轻轻吹打10次,注意不要消化太久,消化的目的是缩小神经球的体积,不要消化能单个神经干细胞,那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基,吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏:
1.大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒取出冻存管后,投入37水浴中,震荡解冻2 min
2. 酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5 ml 37预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心(1000rpm5 min)。
4. 弃去上清,再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基,转入培养瓶中培养。
细胞冻存:液氮冻存(冻存液:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)。
细胞运输:干冰运输(冻存管)/ 常温运输(T-25培养瓶)
细胞鉴定:神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的神经球形态,放大倍数为200x,右图为nestin染色后的荧光图片(绿色),放大倍数为200x
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大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮,因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换;而是每 2 3 天加料一次,直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞,然后继续培养扩增,或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞,将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短