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蛋白A纯化预装柱规格

价格：¥800 - 3800

品牌：研生

产地：进口

最新更新日期：2021-08-16 17:15

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上海研生实业有限公司

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产品属性

数量

英文名	Protein A 4FF Chromatography Column, 1ML

CAS号

详见说明书

保质期

详见说明书

供应商

上海研生

保存条件

低温冷藏

规格

1ml

产品说明

【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：蛋白A纯化预装柱规格
英文名称：Protein A 4FF Chromatography Column, 1ML
产品规格：1ml
发货周期：1～3天
本品ProteinA4FFChromatographyColumn，1ml是一种装填了ProteinAAgaroseResin4FF的中压预装柱，规格1ml，预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如?KTA等，方便客户操作。
天然蛋白A（ProteinA）是一种发现于金黄色葡萄球菌的细胞壁表面蛋白，与分离自G型或C型链球菌属的蛋白G类似，主要通过与免疫球蛋白（Ig）的Fc区相互作用，结合大多数哺乳动物的IgG，可用于多种抗体（单抗和多抗）的分离纯化。在与不用的免疫球蛋白亚类的结合特性上，ProteinA和ProteinG结合性能不太一样（详见附录1）。
本品使用的是基因改造后的蛋白A，不仅维持其本身的Ig亲和特性，同时也去除了天然蛋白本身的非主要结合域以降低非特异性结合，ProteinAAgaroseResin4FF以高度交联的琼脂糖凝胶为基质，重组ProteinA为配基，具有很高的物理化学稳定性，可以在相对较高的流速下进行抗体的纯化，适用于工业客户。利用本品经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体，使用方便，应用广泛。
基质（Matrix）高度交联的4%琼脂糖微球
配体（Ligand）重组蛋白A
孔径（Beadsize）45-165μm
最大流速（Flowmax）0.3MPa,3bar
储存缓冲液含20%乙醇的1×PBS
载量（Capacity）＞40mghumanIgG/ml基质
pH范围3-12
储存条件4℃，有效期两年
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min，不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
蛋白A纯化预装柱规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
4-叔基环已双/双/Bialaphos
4-基砜盐酸洛贝林/2-1-基-6-(beta-羟基)-2-啶盐酸盐/洛贝林盐酸盐/盐酸山梗/盐酸-L-山梗/山梗菜盐酸盐/盐酸-α-祛痰菜/山梗醇盐酸盐/(-)-Lobeline hydrochloride
4-(酰基)苄盐酸盐抗菌素/Zeocin
4-酰缬霉素/基霉素/Valinomycin
2--4,5-二氧沙星/嗪酸/泰利必妥/酸左旋氧沙星/菲宁达/(+/-)-9--2,3-二-3-基-10-(4-基-1-嗪基)-7-氧代-7H-啶并1,2,3-de-1,4并噁嗪-6-羧酸/OFLX
1,1'-二酰基二茂铁美满霉素/盐酸米诺环素/二四环素盐酸/米诺四环素/4,7-双(二基)-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-八-3,10,12,12a-四羟基-1,11-二氧-2-并四酰盐酸盐/Minocycline hydrochloride
2--4-氧基烟腈纺锤菌素二盐酸/纺锤菌素/Netropsin dihydrochloride
4-(2-啶基)环沙星/环酸/1-环基-6--1,4-二-4-氧代-7(1-嗪基)-3-羧酸/酸/悉复欣/悉复欢/适普灵/Ciprofloxacin
N-酰盐盐酸环沙星/盐酸环酸/1-环基-6--1,4-二-4-7(1-嗪基)-3-羧酸盐盐酸水合物/环沙星盐酸盐/Ciprofloxacin hydrochloride
(2R,3S)-1,2-环氧-3-Boc基-4-基氧苄啶/氧苄嘧啶/5-(3,4,5-三氧基)基-2,4-嘧啶二/增效剂/抗菌增效剂/三氧苄嘧啶/氧苄嘧啶/三氧苄二嘧啶/Trimethoprim
蛋白A纯化预装柱规格银杏标准品规格10mg Ginkgolic Acids
银杏内酯标准品规格50mg Ginkgo Terpene Lactones
格列美脲相关物质A标准品规格20mg
格列美脲相关物质D标准品规格20mg
美比达相关物质B标准品规格15mg Glipizide Related Compound B
胰高血糖素标准品规格ea
γ谷酰基S基胱标准品规格25mg
甘罗铵红霉素同分异构体标准品规格25mg
甘罗铵相关物质A标准品规格50mg
甘罗铵相关物质C标准品规格25mg
血纤维蛋白进口、国产 Fibrinfromhumanplasma 含量BR，50u/mg
壬二二2基己酯进口、国产 Bis(2ethylhexyl)Azelate 含量BR，30%
壬基琥珀进口、国产 NSA 含量AR
壬酰4羟3基苄进口、国产 Nonivamide 含量98%
刃天青进口、国产 Resazurinsodiumsalt 含量高，99%
任氏进口、国产任氏含量BR，90%
日落黄FCF 进口、国产 SunsetYellowFCF 含量FMP，75%
溶壁微球菌细胞进口、国产 Microcococcuslysodeikticuscells 含量BR，200u/g
溶剂橙7 进口、国产 SudanⅡ 含量BR，98%
溶剂红19 进口、国产 Sudanred7B 含量BR，98%
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。