技术简介：

实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝对定量，而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合，荧光定量PCR在医学检测及其他各个领域中的应用前景十分广阔。

技术原理：

荧光定量PCR所使用的荧光基团可分为两种：荧光探针和荧光染料。使用SYBR荧光染料法来进行荧光定量PCR时，我们首先在PCR反应体系中加入过量SYBR荧光染料。SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后发射一定量的荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

Taqman探针则是利用探针与模板的特异性结合的特点，以及探针内荧光报告基团和淬灭基团的分子特性来实现对PCR进行定量检测。这种方法可以实现高灵敏度，严格针对特定碱基序列的定量实验。