shRNA干扰载体构建

特点
→ 技术平台：组成型pENTR™/U6载体(cat. No K494500)和诱导型pENTR™/H1/TO载体(cat. No K492000)
→ 构建好的siRNA表达载体，可直接用于转染细胞进行RNA干扰操作。

原理
将短发卡RNA(shRNA)克隆到表达载体并表达短的干扰RNA(siRNA,19-21个核苷酸的RNA双链)的DNA分子。我们可根据靶标设计短发卡RNA(shRNA)序列并将其克隆入BLOCK-iT shRNA载体上。

服务流程
1) 设计BLOCK-iT™ shRNA序列，合成该序列并退火生成双链DNA；
2) 将退火而成的DNA双链与指定的pENTR™/U6或pENTR™/H1/TO载体相连
3) 转化大肠杆菌
4) 测定验证插入序列的正确性
5) 制备甘油菌；提供测序结果和报告给客户

客户提供
→ 靶基因cDNA序列的序列号或有效的siRNA序列；
→ 写明选择的入门载体：
1) 含有组成型U6启动子的pENTR™/U6载体；
2) 含有可诱导的H1/TO启动子的pENTR™/H1/TO载体

我们提供
构建好的BLOCK-iT™ shRNA表达载体和相应的甘油菌

质量保证
载体序列测定结果符合设计要求

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