PikoOrange蛋白定量试剂盒

¥180
李记生物
上海
2021-08-17 06:16

上海李记生物科技有限公司

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产品属性
保存条件室温
保质期至少12个月
英文名/
数量量大从优,欢迎询价
供应商李记生物
CAS号/
规格100 assays
产品说明
PikoOrange 蛋白定量试剂盒
产品描述
PikoOrange Protein Quantitation Kit是一个高度敏感的基于荧光技术定量纯化蛋白质的试剂盒其检测蛋白浓度范围为0.1~10μg/ml。比起传统定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析,PikoOrange蛋白定量试剂盒敏感性更佳,此外,与NanoOrange蛋白质定量测定技术相比具有更加优秀的线性和重现性。PikoOrange蛋白定量试剂盒可显示不同蛋白质之间的最小变异性,且荧光信号稳定长达16 h;其受测样本不论为纯化蛋白或抗体皆适用。需特别注意的是,PikoOrange对盐类、缓冲液、去垢剂或是其他化学物质都有不同程度的耐受性(表1)。
产品信息

产品名称货号规格价格
PikoOrange 蛋白定量试剂盒AP12L034100 assays180
PikoOrange 蛋白定量试剂盒AP12L0361000 assays1500

产品组分
组分AP12L034AP12L036
A: PikoOrange buffer, 10X (contains 2mM sodium azide)2.5 mL25mL
B: PikoOrange dye, 500X in DMSO125μL1.25 mL
C: Bovine serum albumin (BSA) standard, 2mg/mL (contains 2 mM sodium azide)40 μL0.4 mL
保存方法
室温保存不要冷藏PikoOrange缓冲液。PikoOrange Dye需避光保存产品可稳定保存至少6个月。如果缓冲液出现沉淀,可加热到37℃并漩涡溶解。如果长时间不用,组分C应避光保存在4℃
使用方法
  1. 制备1x PikoOrange缓冲液: 1:10 稀释10x缓冲液在dH2O。例如,添加1 mL10x 缓冲液至9 mL dH2O PikoOrange缓冲液可以储存在室温下。
  2. 使用前准备PikoOrange工作液:将200xPikoOrange染料按1:200用1x PikoOrange缓冲液稀释。例如,添加25μL 500x PikoOrange染料5 mL 1x PikoOrange缓冲液。
    注意:您将需要大约3 mL工作液制作标准曲线(见表2)以及每孔检测样品250 μL工作液。
  3. 准备未知样本:10 μL 样本添加 250 μLPikoOrange工作液。
    注意:您可能需要稀释未知样本得到不同浓度的样本。样品稀释可能会减少干扰物质的影响。
  4. 准备一个蛋白质标准曲线所需的BSA浓度,如表2所示。
  5. 样本和标准蛋白加热至90~ 95℃ 10分钟,此过程需避光操作。
  6. 取出样本室温避光放置20 min冷却。短时间离心收集全部样本。
  7. 每个标准样品或未知样品取200 μL转移到96孔酶标板,荧光酶标仪读数。激发/发射波长为480/598 nm。
    【注】:样品可以被转移到荧光试管使用荧光仪测量。如果需要超过200 μL体积测量,等比例放大配置方案。

    1PikoOrange对不同化学物质的耐受性
化合物最高承受浓度
SDS0.01%
Triton X-100Below 0.001%
Tween 20Below 0.001%
CHAPSBelow 0.001%
Sodium deoxycholate (DOC)Below 0.001%
Urea10 mM
DTT100 mM
beta-ME0.1%
Ammonium sulfate1 mM
Sodium azide2 mM
Imidazole50 mM
DNA10ug/mL
EDTA1mM
Sucrose10 mM (0.34%)
Glycerol1%
PBS0.02X
NaCl1 mM
CaCl20.01 mM
MgCl20.2 mM
2准备BSA样品制作标准曲线
BSA体积工作液体积BSA终浓度(μg/mL
A5 μL BSA std (2mg/mL)995μL10
B250 μL solution A250μL5
C250 μL solution B250 μL2.5
D200 μL solution C300μL1
E250 μL solution D250 μL0.5
F250 μL solution E250μL0.25
G100 μL solution F150 μL0.1
H0 μL solution G250 μL0



图1:PikoOrange比NanoOrange有更好的线性和重现性



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