BSA性状定位BSA性状定位(Bulked Segregant Analysis,BSA。集群分离分析)是指针对研究的目标性状,选择表型极端差异的亲本构建家系。利用混池分组分析法,对该家系目标性状表型极端的子代混合成两个样本池进行测序,同时对亲本进行测序,利用高性能计算平台和生物信息学方法,计算影响性状的候选区域以及相应的突变位置和突变类型,实现对目标性状的快速定位,加速作物育种改良。
应用领域1、QTL-seq定位数量性状位点
2、MutMap定位诱变位点和质量性状
适用范围:1、单倍体、二倍体或多倍体物种(有参考基因组序列)
2、家系群体(F2、RILs、DH等家系群体)
测序策略亲本:10X/个,子代:20X/池
样本要求样本类型:genomeDNA 样品;无降解或轻微降解;无污染;
DNA样品量:≥ 1.4 μg,单次;
样本浓度: ≥ 30 ng/µl;
样本纯度:OD260/280=1.8~2.0;
技术流程常见问题Q BSA性状定位的生信分析内容是什么以及其可解决什么问题?
基于比对分析发现SNP、InDel标记,随后根据标记进行差异分析,以获取与目标性状相关的基因。如下表
| 分析内容 | 解决问题 |
| 与参考基因组比对 | 比对率和覆盖度分析 |
| SNP、InDel检测及注释 | 开发SNP、InDel标记 |
| 子代SNP、InDel频率差异分析 | 寻找有差异的SNP、InDel位点 |
| 目标性状区域定位 | 找到与目标性状关联的区域 |
| 候选基因提取和功能注释 | 获得候选基因及基因功能 |
Q BSA性状定位的后期验证怎么进行?
如果检测碱基变化,PCR扩增出目标区域后,用一代测序即可。如果要进行生物功能的验证,要看客户那边具体的实验设计(基因敲除/回补)。