RACE技术服务价格,详情介绍-960化工网

RACE技术服务

价格：询价

最新更新日期：2021-08-18 15:35

我要询单 QQ交流

杭州沃森生物技术有限公司

我要认领

公司：杭州沃森生物技术有限公司

联系人：沈小姐

联系电话： 13732202380 4001580780

联系邮箱：service@ws-bio.com

QQ： 2533813840

产品属性

服务名称

RACE技术服务

提供商

杭州沃森生物

产品说明

RACE全长克隆技术服务

服务背景
RACE(rapid-amplification of cDNA ends)，即cDNA末端快速克隆技术。该技术是基于PCR技术基础上，先由RT-PCR从RNA中获取cDNA片段，根据已知的一段cDNA片段设计引物，利用PCR向两端延伸扩增从而获得完整的3'端或5'端序列，是一种从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3’末端的有效方法。
相比于其他获得新基因的方法，RACE原理简单、无需建立文库、快速廉价，被越来越多科研工作者采用。但在实际实验操作过程中，受多方面因素（比如RNA样品的提取、酶反应的质量、扩增效率的高低）都会直接影响最终结果。而本公司具有多年RACE经验，总结出了一系列的实验技巧，可以高灵敏度、高特异性地扩增稀有RNA样品或低丰度基因，获得目的基因的全长cDNA序列。

实验原理

3'末端RACE
利用mRNA的3'末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核苷酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA。然后用一个基因特异引物(GSP)作为上游引物，用一个含有部分接头序列的通用引物(UPM)作为下游引物，以cDNA第一链为模板，进行PCR循环，把目的基因3' 末端的DNA片段扩增出来。

5'末端RACE
利用mRNA的3'末端的poly（A）尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核苷酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为锁定引物在反转录酶MMLV合成标准第一链cDNA。
利用该反转录酶具有的末端转移酶活性，在反转录达到第一链的5’末端时自动加上3-5个（dC）残基，退火后（dC）残基与含有SMART寡核苷酸序列Oligo(dG)通用接头引物配对后，转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头。然后用一个含有部分接头序列的通用引物(UPM)作为上游引物，用一个基因特异引物(GSP)作为下游引物，以cDNA第一链为模板，进行PCR循环，把目的基因5' 末端的DNA片段扩增出来。

实验流程：
1、总RNA提取以及cDNA反转录
2、根据已知序列设计引物，以cDNA模板进行扩增，验证序列正确性
3、RACE 扩增，并测序，使用锚定PCR（AnchoredPCR）与巢式PCR（Nested PCR）相结合的方法，分别进行3'末端和5'末端RACE并对其产物进行测序
4、根据测序结果拼接目的基因全长cDNA序列
5、将RACE产物进行TA克隆用于后续研究（可根据客户要求自行选择）

服务优势
采用进口试剂,确保实验准确性
较同类产品方法更快速，便捷
丰富的项目经验，超过500例的成功案例
提供全套的后续生物信息学分析服务（可根据客户要求提供个性化分析服务）

服务流程
1、确认客户提供的序列信息
2、评估RACE实验可行性
3、确认样本信息
4、根据客户提供的信息设计好实验方案，销售做出报价合同
4、客户确定无误后签订《沃森生物-RACE检测服务合同》，并签字（或盖章）
5、支付预付款，服务正式启动
6、根据合同实验方案开展实验
8、实验结束后，发送初步实验报告
9、支付实验尾款
10、提供详细实验报告，完成实验项目

材料提交说明
实验样品
1、组织或者细胞：提供尽可能多的新鲜组织或细胞样品(包括3个技术重复)，组织样品不少于200 mg，细胞至少10⁷个
2、RNA样品：3’ RACE：Total RNA>15μg；5’ RACE：Total RNA>25μg（注：OD260/OD280在1.9-2.1之间，完整性好)

序列信息：
1、大于200bp的已知序列(请注明已知序列的5’ 端及3’ 端)：如果已知序列比较短，建议先进行3’ RACE再进行5’ RACE，以提高实验的成功率
2、实验数据和参考文献：这将会帮助我们更好地理解您的实验背景，有利于实验的顺利进行

结果交付
实验结题报告：包括实验步骤，引物信息，实验过程 PCR产物照片，全长序列拼接结果；
测序原始数据：测序彩色波形图、碱基序列图；
实验产物：引物、PCR产物、测序用质粒（限产生克隆测序的情况）。

结果展示

ORF序列图多序列比对图

进化树

二级结构预测图蛋白三级结构预测图

常见问题解答
1、超长片段RACE时要注意什么？
以我们的经验来看，有几下几点建议：
（1）每一轮PCR都需要做个梯度找出最佳退火温度；
（2）检测RNA是否降解，只有确认没有或只有轻微降解后面的实验才有意义；
（3）用于第二轮巢式或半巢式PCR模板的第一轮产物应该以不同倍数稀释；
（4）扩增较长片段时应该适当延长变性时间；
（5） GSP引物设计也不容忽视，需要保证较好的特异性；
（6）使用LA Taq酶，并配以热启动。

2、5’ RACE扩增的电泳结果为什么出现多种条带？
原因可能是：
扩增的基因为多基因家族的成员；
已知序列信息有限，导致PCR扩增特异性差；
mRNA 5′端剪切、拼接方式不同。

3、3’ RACE PCR扩增产物经电泳分析后，有时为什么出现多条带是什么原因？
原因可能是：
序列信息不清楚导致了非特异性扩增；
扩增的基因为多基因家族的成员；
mRNA不同的拼接方式造成的。

参考报价（实际价格以咨询结果为准）

RACE实验技术服务（报价单）
RACE实验技术服务（报价单）
服务项目	价格		周期（工作日）
已知序列验证（800bp以内）	1000元/基因	超过800bp，2元/bp	15-20
5-RACE实验（500 bp以内）	3500元/基因	超过500 bp，2.5元/bp	16-22
3-RACE实验（800 bp以内）	2500元/基因	超过800 bp，2元/bp	15-20
生物信息学分析	2000元/基因		10
基础总价	9000元/基因
注：如果提供的基因富含高GC含量（大于65%），则5-RACE，3-RACE分别加收2000元

服务电话： 400-1580-780 0571-86495259
QQ: 2533813840 手机：13732202380
邮箱： service@ws-bio.com
网址： http://www.ws-bio.com
扫一扫，更多活动尽在其中！
公众号二维码沃森淘宝二维码

960化工网为您提供RACE技术服务的专业供应商信息，包括公司名称，地址，手机，电话，以及该供应商的其他产品和相关产品。